ForeDirect RT-qPCR ኪት
የኪት መግለጫ፡-
◮ለአር ኤን ኤ የመንጻት ሂደቶች ከሌሉ ከስዋብ ስብስቦች ለ RNA ቀጥተኛ የእውነተኛ ጊዜ ማጉላት።ይህ ኪት የqRT-PCR ዑደቶችን በአንድ ሰዓት ውስጥ ያጠናቅቃል።የኢንዛይም ድብልቅ የተመቻቸ የReverse Transcriptase፣ Hot-Start Taq DNA polymerase፣ RNase inhibitor ነው።Reaction Buffer የተመቻቹ ቋት ክፍሎችን ጨምሮ ሁሉንም አስፈላጊ ክፍሎች ይዟል፣ MG2+፣ dUTP እና ዲኤንቲፒዎች።
መግለጫ
ForeDirect RT-qPCR ኪት ያለ አር ኤን ኤ የማጥራት ሂደቶች ከስዋብ ስብስቦች ለአር ኤን ኤ ቀጥታ ጊዜ ማጉላት የተነደፈ ነው።ይህ ኪት የqRT-PCR ዑደቶችን በአንድ ሰዓት ውስጥ ያጠናቅቃል።የኢንዛይም ድብልቅ የተመቻቸ የReverse Transcriptase፣ Hot-Start Taq DNA polymerase፣ RNase inhibitor ነው።Reaction Buffer የተመቻቹ ቋት ክፍሎችን ጨምሮ ሁሉንም አስፈላጊ ክፍሎች ይዟል፣ MG2+፣ dUTP እና ዲኤንቲፒዎች።
ዝርዝሮች
100ቲ
Kit ክፍሎች
| ኑክሊክ አሲድ የሚለቀቅ ወኪል |
| አር ኤን ኤ መከላከያ |
| 2× RT-qPCR ቋት |
| የኢንዛይም ድብልቅ(Taq&M-MLV) |
| መመሪያዎች |
PCR መተግበሪያ
1. የ PCR ምላሽ ቱቦዎች ለአጭር ጊዜ ማዕከላዊ ከተደረጉ በኋላ በማጉያ መሳሪያው ናሙና ማጠራቀሚያ ውስጥ ያስቀምጧቸው.
2. የሙቀት ፕሮቶኮል
| ደረጃ | የሙቀት መጠን | ጊዜ | ዑደቶች | |
| 1 | የተገላቢጦሽ ግልባጭ | 50℃ | 15 ደቂቃ | 1 |
| 2 | ቅድመ-denaturation | 95 ℃ | 1 ደቂቃ | 1 |
| 3 | ዲናትዩሽን | 95 ℃ | 10 ሰከንድ | 42 |
| 4 | Anneal / ቅጥያ | 60℃ | 30 ሰከንድ | |
ማስታወሻ:የፍሎረሰንት ምልክት ከእያንዳንዱ ዑደት ማራዘሚያ ደረጃ በኋላ ወዲያውኑ ተገኝቷል።
3. ካቀናበሩ በኋላ ፋይሉን ያስቀምጡ እና የምላሽ ፕሮግራሙን ያሂዱ.
የአሠራር ደረጃዎች
ሪአጀንት ከመዘጋጀቱ በፊት በመሳሪያው ውስጥ ያሉት ሁሉም ሬጀንቶች በክፍል ሙቀት ውስጥ መቅለጥ እና በቀስታ መቀላቀል አለባቸው።
Reagent ዝግጅት
1. የኑክሊክ አሲድ መልቀቂያ ቅልቅል ያዘጋጁ
| አካል | መጠን በአንድ ናሙና ወይም ቁጥጥር |
| ኑክሊክ አሲድ የሚለቀቅ ወኪል | 5μL |
| አር ኤን ኤ መከላከያ | 0.5 ማይልስ |
2. የምላሽ ድብልቅን ያዘጋጁ
| አካል | መጠን በአንድ ናሙና ወይም ቁጥጥር |
| 2× RT-qPCR ቋት | 15 μኤል |
| የኢንዛይም ድብልቅ(Taq&M-MLV) | 1.5 ማይልስ |
| ፕሪመርስ እና መመርመሪያዎች | 1μL |
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
- ኪቱ በ -20 መቀመጥ አለበት።± 5℃.ተቀባይነት ያለው ጊዜ 12 ወራት ነው.
- ተደጋጋሚ የቀዝቃዛ ዑደቶችን ያስወግዱ (<5 ዑደቶች)።
