ቀጥታ RT-qPCR ኪት III
የኪት መግለጫ፡-
◮Direct RT-qPCR Kit፣ Foreasy Reverse Transcriptase እና Foreasy HS Taq DNA Polymerase በ Foregene የሚገነባ ልዩ ምላሽ ቋት ይህን ኪት በጠንካራ ተቃውሞ እና ተኳኋኝነት ያደርገዋል እና በቀጥታ የ Foregene Lysis ስርዓትን እንደ አብነት መጠቀሙን ሊሞክር ይችላል።ይህ ኪት ለኮቪድ-19 ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት እና ለሌሎች በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት ልማት ማመልከት ይችላል።
መግለጫ
ቀጥታ RT-qPCR ኪት በተለየ የታሸገ RT-qPCR ቋት (ከፎሬሲ HS Taq ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ ድብልቅ ጋር) እና ከፍተኛ ብቃት ይሰጣል።የቅድሚያ ተቃራኒ ትራንስክሪፕትሴ (ኤም.ኤም.ኤል.ቪ)፣በቀላል ማረጋገጫ ውስጥ የኋላ-መጨረሻ ስብስቦችን እና የስርዓት ማስተካከያዎችን ለመፍጠር ምቹ ያደርገዋል።
Direct RT-qPCR Kit፣ Foreasy Reverse Transcriptase እና Foreasy HS Taq DNA Polymerase በ Foregene የሚገነባ ልዩ ምላሽ ቋት ይህን ኪት በጠንካራ ተቃውሞ እና ተኳኋኝነት ያደርገዋል እና በቀጥታ የ Foregene Lysis ስርዓትን እንደ አብነት መጠቀሙን ሊሞክር ይችላል።ይህ ኪት ለኮቪድ-19 ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት እና ለሌሎች በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት ልማት ማመልከት ይችላል።
ይህ ኪት በቀላሉ እና በፍጥነት በመጠቀም የ IVD ምርት አካል ሊሆን ይችላል።እንደገና ሳያድግ ቀላል ማረጋገጫ ብቻ ነው የሚያስፈልገው።
ዝርዝሮች
500ቲ፣ 50,000ቲ
Kit ክፍሎች
| የኪት ይዘቶች (20 μl ምላሽ ሥርዓት) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 ቲ | 50,000 ቲ | |
| ቅድመ ሁኔታ አርኢቨርስ ትራንስክሪፕትሴ(200 U/μL) | 50 μኤል×1 | 1 ሚሊ×5 |
| 2× ቀጥተኛ qPCRቅልቅል-ታክማን | 1 ሚሊ × 5 | 500 ሚሊ ሊትር×1 |
| መመሪያ | 1 | 1 |
የአሠራር ደረጃዎች
መ: አብነት እና reagent አዘጋጅ
1. የተዘጋጀውን አር ኤን ኤ አብነት ማዘጋጀት (የአር ኤን ኤ አብነት ለማውጣት እና ለማጣራት Foregene Total RNA Isolation Kit ተከታታይ ኪት ለመጠቀም ይመከራል) ወይም የናሙና መሰንጠቅ ምርት (Foregene Lysis system) የተወሰኑ ፕሪመር (10 μM) እና ሌሎች ተዛማጅ ፍጆታዎች፣ መሳሪያ።
2. 2× Direct RT-qPCR Buffer፣ RNase-Free ddH2O እና 20× ROX ማመሳከሪያ ዳይ(የሚያስፈልግ ከሆነ) በሳጥኑ ውስጥ ከበረዶ ጋር አስቀምጡ፣ እነዚህም በተፈጥሮ እንዲቀልጡ እና በቀስታ እንዲቀላቀሉ አድርጉ።
ለ: የ RT-qPCR ስርዓት ማዘጋጀት
የግማሽ መጠን የምላሽ ቋት ምላሽ ያግኙ (ለምሳሌ የስርዓቱ መጠን 20 μL ከሆነ 10 μL 2× Direct RT-qPCR ቋት ማግኘት አለበት።). ለተመጣጣኝ የኢንዛይም መጠንእኛ እንመክራለንM-MLV: 10-30 U/20 μL ምላሽ ሥርዓት,ታቅዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ፦1-2 U / 20 μL ምላሽ ሥርዓትይህ የእኛ ሀሳብ ነው ፣ ፈትኑት እና ያስተካክሉት።)፣ የአርኤንኤን አብነት፣ የተወሰኑ ፕሪመርሮች እና መመርመሪያዎችን ይጨምሩ፣ እና ከRNase-ነጻ ddH ያክሉ2ከኦ እስከ 20 μLየ RT-qPCR ምላሽ ስርዓት ልዩ ዝግጅት ወደሚከተለው ሠንጠረዥ 1 ሊያመለክት ይችላል።
ሠንጠረዥ 1: የ RT-qPCR ስርዓት ማዘጋጀት
| አካል | መጠን | የመጨረሻ ትኩረት |
| 2× ቀጥተኛ RT-qPCR ቋት | 10 μኤል | 1× |
| አስቀድሞ የተገለበጠ ትራንስክሪፕትሴ (ኤም.ኤም.ኤል.ቪ) | 10-30 ዩ | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 ዩ | |
| ወደፊት ፕሪመር (10 μM) | 0.8 ማይልስ | 50-900nM |
| ተገላቢጦሽ ፕሪመር (10 μM) | 0.8 ማይልስ | 50-900nM |
| ምርመራ (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| አብነት (አር ኤን ኤ ወይም Lysate) | X μL | |
| 20× ROX ማጣቀሻ ማቅለሚያ | - | 1* |
| RNase-FreddH2O | (6.4-X) μL | |
| ጠቅላላ መጠን | 20 μኤል |
ማሳሰቢያ፡ Forward Primer እና Reverse Primer የዒላማ ዘረ-መል (ጅን) የተወሰኑ ፕሪመርሮች ናቸው።የqPCR ስርዓት በተግባራዊ የሙከራ እና PCR ሞዴሎች መሰረት ሊስተካከል ይችላል።ለአብዛኛዎቹ ፕሪመር የመጨረሻ ትኩረት 400nM እንመክራለን።በተዘጋጀው ትኩረት እና በሚመከረው የመጨረሻ ትኩረት መሰረት የተወሰኑ ፕሪመርሮችን እና መመርመሪያዎችን መጠን ያስተካክሉ።
1*: በተለያዩ የቁጥር PCR መሳሪያዎች መሰረት ተስማሚ የሆነውን የ ROX Reference Dye የመጨረሻ ትኩረትን ይምረጡ።የጋራ መጠናዊ PCR መሳሪያዎች ጥሩው የ ROX ማጣቀሻ ቀለም በሚከተለው ሠንጠረዥ ውስጥ ይታያል።
| የቁጥር PCR መሳሪያዎች | የ ROX ማጣቀሻ ማቅለሚያ የመጨረሻ ትኩረት |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/ደረጃ አንድ፣ወዘተ. | 1 × (ለምሳሌ፣ በ20 μL ምላሽ ሥርዓት ውስጥ 1μl 20×ROX ማመሳከሪያ ቀለም ይጨምሩ) |
| ABI 7500፣ 7500 ፈጣን፣ Stratagene Mx3000P፣ Mx3005P እና Mx4000፣ ወዘተ. | 0.5× (ለምሳሌ፣ በ20 μL ምላሽ ሥርዓት ውስጥ 0.5μl 20×ROX ማመሳከሪያ ቀለም ይጨምሩ) |
| Roche PCR መሣሪያ፣ ባዮ-ራድ PCR መሣሪያ፣ Eppendorf quantitative PCR መሣሪያ፣ ወዘተ. | ያለ ROX ማጣቀሻ ማቅለሚያ |
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
እቃው በ -20 ± 5 ℃ ውስጥ መቀመጥ አለበት.ወዲያውኑ በ -20 ℃ ቴርሞስታቲክ ማቀዝቀዣ ውስጥ መቀመጥ አለበት.ተስማሚ በሆነ ሁኔታ ውስጥ ከተቀመጠ ተቀባይነት ያለው ጊዜ 2 ዓመት ነው.
