ቀጥታ RT-qPCR ኪት
የኪት መግለጫ፡-
◮ Direct RT-qPCR Kit፣ Foreasy Reverse Transcriptase እና Foreasy HS Taq DNA Polymerase በ Foregene የሚገነባ ልዩ ምላሽ ቋት ይህን ኪት በጠንካራ ተቃውሞ እና ተኳኋኝነት ያደርገዋል እና በቀጥታ የ Foregene Lysis ስርዓትን እንደ አብነት መጠቀሙን ሊሞክር ይችላል።ይህ ኪት ለኮቪድ-19 ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት እና ለሌሎች በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ኑክሊክ አሲድ መፈለጊያ ኪት ልማት ማመልከት ይችላል።
መግለጫ
Direct RT-qPCR ኪት በተናጠል የታሸገ RT-qPCR ቋት እና ከፍተኛ ቀልጣፋ ኢንዛይም ያቀርባልድብልቅ (ታክ ፣ ኤም-ኤምኤልቪ ፣ RI) ፣ የኋላ-መጨረሻ ስብስቦችን እና ስርዓትን ለመፍጠር ምቹ ያደርገዋል።ማስተካከያ, በቀላል ማረጋገጫ ውስጥ.
ዝርዝሮች
500ቲ፣ 50,000ቲ
Kit ክፍሎች
| የኪት ይዘቶች (20 μl ምላሽ ሥርዓት) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ቲ | 50,000 ቲ | |
| ቀጥተኛ የኢንዛይም ድብልቅ | 500 μል×1 | 50 ሚሊ ሊትር×1 |
| 2× ቀጥተኛ RT-qPCR ቋት | 1 ሚሊ×5 | 500 ሚሊ ሊትር×1 |
| መመሪያ | 1 | 1 |
የአሠራር ደረጃዎች
ሪአጀንት ከመዘጋጀቱ በፊት በመሳሪያው ውስጥ ያሉት ሁሉም ሬጀንቶች በክፍል ሙቀት ውስጥ መቅለጥ እና በቀስታ መቀላቀል አለባቸው።
A: አዘጋጅ of አብነት እና ሬጀንት
1. የተዘጋጀውን አር ኤን ኤ አብነት ማዘጋጀት (የአር ኤን ኤ አብነት ለማውጣት እና ለማጣራት Foregene Total RNA Isolation Kit ተከታታይ ኪት ለመጠቀም ይመከራል) ወይም የናሙና መሰንጠቅ ምርት (Foregene Lysis system) የተወሰኑ ፕሪመር (10 μM) እና ሌሎች ተዛማጅ ፍጆታዎች፣ መሳሪያ።
2. 2× ቀጥታ RT-qPCR ቋት፣ ከRNase-ነጻ ddH2O እና 20× ROX ማመሳከሪያ ዳይ (ከሆነ's ያስፈልጋል) በበረዶ ውስጥ በሳጥኑ ውስጥ, እነዚህ በተፈጥሮ እንዲቀልጡ በማድረግ እና በቀስታ እንዲቀላቀሉ ማድረግ.
B: አዘጋጅ of RT-qPCR ስርዓት
ጠረጴዛ 1 : አዘጋጅ of RT-qPCR sስርዓት
| አካል | መጠን | የመጨረሻ ትኩረት |
| 2× ቀጥተኛ RT-qPCR ቋት | 10 μኤል | 1× |
| ቀጥተኛ የኢንዛይም ድብልቅ | 1μL | |
| ወደፊት ፕሪመር (10 μM) | 0.8 ማይልስ | 50-900nM |
| ተገላቢጦሽ ፕሪመር (10 μM) | 0.8 ማይልስ | 50-900nM |
| ምርመራ (4 μM) | 1μL | 200nM |
| አብነት (አር ኤን ኤ ወይም Lysate) | X μL | |
| 20× ROX ማጣቀሻ ማቅለሚያ | - | 1* |
| RNase-FreddH2O | (6.4-X) μL | |
| ጠቅላላ መጠን | 20μL |
C: አዘጋጅ የ RT-qPCR ምላሽ ፕሮግራም
ጠረጴዛ 2 : RT-qPCR ምላሽ መስጠትon ፕሮግራም ቅንብር (ለ ለምሳሌ: ሁለት-ደረጃ ዘዴ)
| ደረጃ | የሙቀት መጠን | ጊዜ | ዑደቶች | ይዘት | |
| 1 | 50℃ | 15 ደቂቃ | 1* | 1 | የተገላቢጦሽ ግልባጭ |
| 2 | 95 ℃ | 1 ደቂቃ | 1 | ቅድመ-denaturation | |
| 3 | 95 ℃ | 10 ሰከንድ | 40-45 | ዲናትዩሽን | |
| 60℃ | 30 ሰከንድ 2* | Anneal / ቅጥያ | |||
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
- ኪቱ በ -20 መቀመጥ አለበት።± 5℃.ተቀባይነት ያለው ጊዜ 12 ወራት ነው.
- ተደጋጋሚ የቀዝቃዛ ዑደቶችን ያስወግዱ (<5 ዑደቶች)።
