የመሠረታዊ ሞለኪውላር ባዮሎጂ ቃላት ማብራሪያ
1. ሲዲ ኤን ኤ እና ሲሲዲ ኤን ኤ፡ ሲዲኤንኤ ከኤምአርኤን በተገላቢጦሽ የተፈጠረ ባለ ሁለት መስመር ዲ ኤን ኤ ነው።ሲሲሲዲኤንኤ ከክሮሞሶም ነፃ የሆነ ፕላዝማድ ድርብ-ክር ዝግ ክብ ዲ ኤን ኤ ነው።
2. መደበኛ ማጠፍያ ክፍል፡- የፕሮቲን ሁለተኛ ደረጃ መዋቅር ክፍል α-helix እና β-sheet በተለያዩ ተያያዥ ፖሊፔፕቲዶች አማካኝነት ልዩ የጂኦሜትሪክ ዝግጅቶችን በመጠቀም መዋቅራዊ ብሎኮችን መፍጠር ይችላሉ።ይህ ዓይነቱ የተወሰነ መታጠፍ ብዙውን ጊዜ ሱፐር ሁለተኛ ደረጃ መዋቅር ይባላል።ከሞላ ጎደል ሁሉም የሶስተኛ ደረጃ አወቃቀሮች በእነዚህ የመታጠፊያ ዓይነቶች እና በተጣመሩ ዓይነቶቻቸው ሊገለጹ ስለሚችሉ እንዲሁ መደበኛ ማጠፊያ ክፍሎች ይባላሉ።
3. CAP: ሳይክሊክ adenosine monophosphate (cAMP) ተቀባይ ፕሮቲን CRP (cAMP ተቀባይ ፕሮቲን), ከ CAMP እና CRP ጥምር በኋላ የተፈጠረው ውስብስብ ፕሮቲን CAP (cAMP ገቢር ፕሮቲን) ይባላል.
4. ፓሊንድሮሚክ ቅደም ተከተል፡- የዲ ኤን ኤ ቁራጭ ክፍል ተቃራኒ ማሟያ ቅደም ተከተል፣ ብዙ ጊዜ ገደብ ያለው የኢንዛይም ቦታ።
5. ማይክሮ አር ኤን ኤ፡ ተጨማሪ ጣልቃ የሚገባ አር ኤን ኤ ወይም አንቲሴንስ አር ኤን ኤ፣ እሱም ከ mRNA ቅደም ተከተል ጋር የሚጣመር እና የኤምአርኤን ትርጉምን ሊገታ ይችላል።
6. Ribozyme: አር ኤን ኤ ከካታሊቲክ እንቅስቃሴ ጋር, በአር ኤን ኤ ውስጥ የመገጣጠም ሂደት ውስጥ ራስ-ካታሊቲክ ሚና ይጫወታል.
7. ሞቲፍ፡- በፕሮቲን ሞለኪውሎች የቦታ መዋቅር ውስጥ ተመሳሳይ ባለ ሶስት አቅጣጫዊ ቅርፅ እና ቶፖሎጂ ያላቸው አንዳንድ የአካባቢ ክልሎች አሉ።
8. ሲግናል peptide: ፕሮቲን ውህድ ወቅት N-terminus ላይ 15-36 አሚኖ አሲድ ቀሪዎች ጋር peptide, ይህም ፕሮቲን transmembrane ይመራል.
9. Attenuator: በኦፕሬተር ክልል እና በመዋቅራዊ ጂን መካከል ያለው የኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ግልባጭን የሚያቋርጥ።
10. Magic Spot፡- ባክቴሪያው ሲያድግ እና ሙሉ በሙሉ የአሚኖ አሲድ እጥረት ሲያጋጥመው ባክቴሪያው ሁሉንም የጂኖች አገላለጽ ለማስቆም የአደጋ ጊዜ ምላሽ ይሰጣል።ይህንን የአደጋ ጊዜ ምላሽ የሚያመነጩት ምልክቶች ጓኖሲን ቴትራፎስፌት (ፒፒጂፒ) እና ጓኖሲን ፔንታፎስፌት (pppGpp) ናቸው።የፒፒጂፒ እና የፒፒጂፒ ሚና አንድ ወይም ጥቂት ኦፔራዎች ብቻ አይደሉም ነገር ግን ብዙ ቁጥራቸውን ይነካል ስለዚህ ሱፐር-ተቆጣጣሪዎች ወይም አስማታዊ ቦታዎች ይባላሉ.
11. የላይ አራማጅ አካል፡- በአስተዋዋቂው እንቅስቃሴ ውስጥ የቁጥጥር ሚና የሚጫወተውን የዲኤንኤ ቅደም ተከተል ማለትም እንደ TATA በ -10 ክልል፣ TGACA በ -35 ክልል፣ ማበልጸጊያዎች እና አቴንስተሮችን ያመለክታል።
12. የዲ ኤን ኤ ምርመራ፡ የማይታወቁ ቅደም ተከተሎችን እና የዒላማ ጂኖችን ለመለየት በሰፊው ጥቅም ላይ የሚውል የዲ ኤን ኤ ክፍል ከታወቀ ቅደም ተከተል ጋር።
13. የኤስዲ ቅደም ተከተል፡- ትርጉሙን የሚቆጣጠረው የሪቦዞም እና ኤምአርኤን አስገዳጅ ቅደም ተከተል ነው።
14. ሞኖክሎናል አንቲቦዲ፡ በአንድ አንቲጂኒክ መወሰኛ ላይ ብቻ የሚሰራ ፀረ እንግዳ አካል።
15. ኮስሚድ፡- የ COS ክልሎችን በሁለቱም የphage ጫፎች ላይ የሚይዝ እና ከፕላዝማይድ ጋር የተገናኘ በሰው ሰራሽ መንገድ የተገነባ ውጫዊ የዲ ኤን ኤ ቬክተር ነው።
16. ሰማያዊ-ነጭ ስፖት ማጣራት፡- LacZ ጂን (ኢንኮዲንግ β-galactosidase)፣ ኢንዛይሙ ክሮሞጂካዊ ንጥረ ነገር X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ሰማያዊን በማውጣት ውጥረቱን ሰማያዊ ያደርገዋል።ውጫዊው ዲ ኤን ኤ ወደ ውስጥ ሲገባ, የLacZ ጂን ሊገለጽ አይችልም, እና ውጥረቱ ነጭ ነው, ስለዚህም እንደገና የተዋሃዱ ባክቴሪያዎችን ለማጣራት.ይህ ሰማያዊ-ነጭ ማጣሪያ ይባላል.
17. Cis-acating element፡- የጂን አገላለፅን የሚቆጣጠር በዲ ኤን ኤ ውስጥ ያለ ልዩ ቅደም ተከተል።
18. ክሌኖው ኢንዛይም፡ ትልቅ የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬሴስ I ክፍልፋይ፣ የ 5' 3' exonuclease እንቅስቃሴ ከዲኤንኤ ፖሊሜሬሴ I holoenzyme ካልተወገደ በስተቀር።
19. Anchored PCR፡ የፍላጎት ዲ ኤን ኤውን በአንድ ጫፍ ላይ በሚታወቅ ቅደም ተከተል ለማጉላት ይጠቅማል።አንድ ፖሊ-ዲጂ ጅራት ወደማይታወቅ ቅደም ተከተል አንድ ጫፍ ላይ ተጨምሯል, ከዚያም ፖሊ-ዲሲ እና የታወቀው ቅደም ተከተል ለ PCR ማጉላት እንደ ፕሪመርስ ጥቅም ላይ ውለዋል.
20. ፊውዥን ፕሮቲን፡ የ eukaryotic ፕሮቲን ጂን ከኤክስዮጂን ጂን ጋር የተገናኘ ሲሆን ፕሮቲን ከኦሪጅናል ጂን ፕሮቲን እና ከውጪ ፕሮቲን የተተረጎመ ፕሮቲን በተመሳሳይ ጊዜ ይገለጻል።
ሌሎች ሞለኪውላር ባዮሎጂ ቃላት
1. የዲ ኤን ኤ ፊዚካል ካርታ የዲኤንኤ ሞለኪውል (የገደብ ኤንዶኑክለስ-የተፈጩ) ቁርጥራጮች የተደረደሩበት ቅደም ተከተል ነው።
2. የ RNase መሰንጠቅ በሁለት ዓይነቶች ይከፈላል (autocatalysis) እና (heterocatalysis)።
3. በፕሮካርዮት ውስጥ ሶስት የማስነሻ ምክንያቶች (IF-1)፣ (IF-2) እና (IF-3) ናቸው።
4. Transmembrane ፕሮቲኖች መመሪያ ያስፈልጋቸዋል (ሲግናል peptides), እና ፕሮቲን chaperones ሚና (peptide ሰንሰለት ወደ ፕሮቲን ተወላጅ conformation ውስጥ ማጠፍ ይረዳል).
5. በአስተዋዋቂዎች ውስጥ ያሉ ንጥረ ነገሮች በአጠቃላይ በሁለት ዓይነት ሊከፈሉ ይችላሉ፡ (ኮር ፕሮሞተር ኤለመንቶች) እና (የላይኛው አራማጅ አካላት)።
6. የሞለኪውላር ባዮሎጂ የምርምር ይዘት በዋነኛነት ሦስት ክፍሎችን ያጠቃልላል፡ (መዋቅራዊ ሞለኪውላር ባዮሎጂ)፣ (የጂን አገላለጽ እና ደንብ) እና (ዲ ኤን ኤ መልሶ ማጣመር ቴክኖሎጂ)።
7. ዲ ኤን ኤ የጄኔቲክ ቁስ መሆኑን የሚያሳዩት ሁለቱ ቁልፍ ሙከራዎች (የአይጥ pneumococcus infection) እና (T2 phage infection of Escherichia coli) ናቸው።አቅም)።
8. በ hnRNA እና mRNA መካከል ሁለት ዋና ዋና ልዩነቶች አሉ፡ (hnRNA ወደ ኤምአርኤን በመቀየር ሂደት ውስጥ ተከፋፍሏል) (የኤምአርኤንኤው 5' ጫፍ በ m7pGppp ቆብ ተጨምሯል እና በ mRNA አሲድ (ፖሊኤ) ጅራት 3' ጫፍ ላይ ተጨማሪ ፖሊዲኔሊሽን አለ።
9. የብዝሃ-ንዑስ ፕሮቲን ጥቅማጥቅሞች (ንዑስ ክፍል ለዲኤንኤ አጠቃቀም ኢኮኖሚያዊ ዘዴ ነው) ፣ (በፕሮቲን ውህደት ውስጥ የዘፈቀደ ስህተቶችን በፕሮቲን እንቅስቃሴ ላይ ያለውን ተፅእኖ ሊቀንስ ይችላል) (እንቅስቃሴ በጣም ቀልጣፋ እና በፍጥነት ይከፈታል እና ይዘጋሉ) ናቸው።
10. የፕሮቲን ማጠፍ ዘዴ ዋናው የኒውክሊየሽን ፅንሰ-ሀሳብ (ኒውክሊየሽን)፣ (መዋቅራዊ ማበልጸጊያ)፣ (የመጨረሻ ማደራጀት) ያካትታል።
11. ጋላክቶስ በባክቴሪያ ላይ ሁለት ተጽእኖ ይኖረዋል;በአንድ በኩል (ለሴል እድገት እንደ ካርቦን ምንጭ ሆኖ ሊያገለግል ይችላል);በሌላ በኩል (እንዲሁም የሴል ግድግዳ አካል ነው).ስለዚህ, ከበስተጀርባ ደረጃ ለቋሚ ውህደት የ cAMP-CRP-ገለልተኛ አራማጅ S2 ያስፈልጋል;በተመሳሳይ ጊዜ, የከፍተኛ ደረጃ ውህደትን ለመቆጣጠር የ cAMP-CRP ጥገኛ አራማጅ S1 ያስፈልጋል.ግልባጭ ከ( S2) በጂ እና ከ(S1) ያለ ጂ ይጀምራል።
12. ድጋሚ የዲኤንኤ ቴክኖሎጂ (ጂን ክሎኒንግ) ወይም (ሞለኪውላር ክሎኒንግ) በመባልም ይታወቃል።የመጨረሻው ግብ (በአንድ አካል ውስጥ ያለውን የጄኔቲክ መረጃ ዲ ኤን ኤ ወደ ሌላ አካል ማስተላለፍ) ነው.የተለመደው የዲኤንኤ መልሶ ማጣመር ሙከራ ብዙውን ጊዜ የሚከተሉትን ደረጃዎች ያካትታል፡- (1) የለጋሽ አካልን ኢላማ ዘረ-መል (ወይም ውጫዊ ጂን) ያውጡ እና ኢንዛይም በሆነ መልኩ ከሌላ ዲኤንኤ ሞለኪውል (ክሎኒንግ ቬክተር) ጋር በማገናኘት አዲስ የዲኤንኤ ሞለኪውል ይፈጥራል።② የዲ ኤን ኤ ሞለኪውል ወደ ተቀባይ ሴል ተላልፏል እና በተቀባዩ ሕዋስ ውስጥ ይባዛል.ይህ ሂደት ትራንስፎርሜሽን ይባላል።③ ድጋሚ ዲ ኤን ኤውን የወሰዱ ተቀባይ ህዋሶችን ያያሉ እና ይለዩዋቸው።④የውጭ የእርዳታ ዘረ-መል መገለጡን ለማወቅ ዳግመኛ ዲ ኤን ኤ የያዙ ሴሎችን በብዛት ማልማት።
13. ሁለት አይነት የፕላስሚድ ማባዛት አለ፡ በሆስት ሴል ፕሮቲን ውህደት ጥብቅ ቁጥጥር የሚደረግላቸው (tight plasmids) ይባላሉ እና በሆስት ሴል ፕሮቲን ውህደት ጥብቅ ቁጥጥር ያልተደረገላቸው (ዘና ያለ ፕላስሲዶች) ይባላሉ።
14. የ PCR ምላሽ ስርዓት የሚከተሉት ሁኔታዎች ሊኖሩት ይገባል፡- ሀ.የዲኤንኤ ፕሪመርሮች (ወደ 20 መሠረቶች) በእያንዳንዱ የዒላማ ዘረ-መል (ጅን) ሁለት ክሮች ጫፍ ላይ ተጨማሪ ቅደም ተከተሎች ያሉት።ለ.እንደ የሙቀት መረጋጋት ያሉ ኢንዛይሞች: TagDNA polymerase.ሐ፣ ዲኤንቲፒድ፣ የዲኤንኤ የፍላጎት ቅደም ተከተል እንደ አብነት
15. የ PCR መሰረታዊ ምላሽ ሂደት ሶስት እርከኖችን ያካትታል፡(denaturation)፣ (አኒሊንግ) እና (ማራዘሚያ)።
16. transgenic እንስሳት መሠረታዊ ሂደት ብዙውን ጊዜ የሚከተሉትን ያካትታል: ① የተዳቀለ እንቁላል ወይም የፅንስ ግንድ ሕዋስ አስኳል ውስጥ cloned የውጭ ጂን መግቢያ;②የተከተበው የዳበረ እንቁላል ወይም የፅንስ ግንድ ሴል ወደ ሴቷ ማህፀን ውስጥ መቀየር;③ሙሉ የፅንስ እድገት እና እድገት የውጭ ጂኖች ላሉት ዘሮች;④ አዳዲስ የግብረ-ሰዶማውያን መስመሮችን ለማራባት የውጭ ፕሮቲኖችን እንደ እርባታ የሚያመርቱትን እንስሳት ይጠቀሙ።
17. Hybridoma ሴል መስመሮች የሚመነጩት (ስፕሊን ቢ) ሴሎችን ከ (ማይሎማ) ሴሎች ጋር በማዳቀል ነው, እና (የስፕሊን ሴሎች) hypoxanthine ሊጠቀሙ ስለሚችሉ እና (የአጥንት ሴሎች) የሕዋስ ክፍፍል ተግባራትን ስለሚሰጡ, በ HAT መካከለኛ ውስጥ ሊበቅሉ ይችላሉ.ማደግ
18. በጥልቅ ምርምር, የመጀመሪያው ትውልድ ፀረ እንግዳ አካላት (ፖሊክሎናል ፀረ እንግዳ አካላት), ሁለተኛው ትውልድ (ሞኖክሎናል ፀረ እንግዳ አካላት) እና ሦስተኛው ትውልድ (የጄኔቲክ ኢንጂነሪንግ ፀረ እንግዳ አካላት) ይባላል.
19. በአሁኑ ጊዜ የነፍሳት ቫይረሶች የጄኔቲክ ኢንጂነሪንግ በዋነኝነት የሚያተኩረው በ baculovirus ላይ ሲሆን ይህም በመግቢያው (exogenous toxin gene) ላይ ይታያል;(የነፍሳትን መደበኛ የሕይወት ዑደት የሚያበላሹ ጂኖች);(የቫይረስ ጂኖችን ማሻሻል).
20. በአጥቢው አር ኤን ኤ ፖሊመሬሴ II ፕሮሞተር ውስጥ ከተለመዱት ንጥረ ነገሮች TATA፣ GC እና CAAT ጋር የሚዛመዱ ትራንስ-አክቲንግ ፕሮቲን ምክንያቶች (TFIID)፣ (SP-1) እና (CTF/NF1) ናቸው።
ሃያ አንድ.የአር ኤን ኤ polymerase Ⅱ መሰረታዊ የጽሑፍ ግልባጭ ምክንያቶች TFⅡ-A፣ TFⅡ-B፣ TFII-D፣ TFⅡ-E ናቸው፣ እና የእነሱ አስገዳጅ ቅደም ተከተል፡ (D፣ A፣ B፣ E) ነው።የ TFII-D ተግባር (ከ TATA ሳጥን ጋር የተያያዘ) የሆነበት።
ሃያ ሁለት.ከዲ ኤን ኤ ጋር የሚገናኙት አብዛኞቹ የመገለባበጥ ምክንያቶች በዲሜር መልክ ይሠራሉ።ከዲኤንኤ ጋር የሚያያዙት የጽሑፍ ግልባጭ ምክንያቶች ተግባራዊ ጎራዎች በተለምዶ የሚከተሉት ናቸው (ሄሊክስ-ተርን-ሄሊክስ)፣ (ዚንክ ጣት ሞቲፍ)፣ (መሰረታዊ-ሌዩሲን) ዚፔር ሞቲፍ)።
ሃያ ሶስት.ሶስት ዓይነት ገደቦች አሉ endonuclease cleavage modes: (በሲሜትሪ ዘንግ 5' ጎን 5' የተጣበቁ ጫፎችን ለማፍለቅ) (በሲሜትሪ ዘንግ በ 3' ጎን በመቁረጥ 3' የተጣበቁ ጫፎች (ጠፍጣፋ ክፍሎችን ለመፍጠር በሲሜትሪ ዘንግ ላይ ይቁረጡ) ).
ሃያ አራት.የፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ ሦስት የተለያዩ አወቃቀሮች አሉት፡ (SC ውቅር)፣ (oc ውቅር)፣ (L ውቅር)።በኤሌክትሮፊዮሬሲስ ውስጥ የመጀመሪያው (የኤስ.ሲ. አወቃቀር) ነው.
25. ውጫዊ የጂን አገላለጽ ስርዓቶች, በዋናነት (Escherichia coli), (እርሾ), (ነፍሳት) እና (የአጥቢ ሕዋስ ጠረጴዛ).
26. ለትራንስጂኒክ እንስሳት በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት ዘዴዎች፡ (የሪትሮቫይራል ኢንፌክሽን ዘዴ)፣ (ዲ ኤን ኤ ማይክሮኢንጀክሽን ዘዴ)፣ (የፅንስ ስቴም ሴል ዘዴ) ናቸው።
ትግበራ ሞለኪውላር ባዮሎጂ
1. ከ 5 በላይ አር ኤን ኤዎች ተግባራትን ይሰይሙ?
የአር ኤን ኤ ቲ አር ኤን ያስተላልፉ አሚኖ አሲድ ሪቦዞም አር ኤን ኤ አር ኤን ኤ ሪቦዞም መልእክተኛ አር ኤን ኤ አር ኤን ኤ ኤን አር ኤን ኤ ፕሮቲን ውህደት አብነት ይመሰረታል የተለያዩ የኒውክሌር አር ኤን ኤ ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን አር ኤን ኤን ኤን አር ኤን ኤን ኤን አር ኤን ኤን ኤን ኤን ኤን ኤን ኤን ኤን ኤንኤን በማሰራጨት ላይ ተሳትፏል ሪቦሶም ፕሮቲን ፕላዝማ እና አር ኤን ኤ ኤን ኤ አር ኤን ኤ ፕሮቲን የተፈጠረ ፀረ-አማካይ አካላት ሬቲኩሉም የተፈጠረ ምላሽ Ribozyme አር ኤን ኤ ኢንዛይማዊ ንቁ አር ኤን ኤ
2. በፕሮካርዮቲክ እና በ eukaryotic አራማጆች መካከል ያለው ዋና ልዩነት ምንድን ነው?
ፕሮካርዮቲክ TTGACA --- ታታአት------የመጀመሪያ ቦታ-35 -10 ዩኩሪዮቲክ ማበልጸጊያ ---ጂሲ ---CAAT----TAATAA-5mGpp-የማስጀመሪያ ጣቢያ-110 -70 -25
3. የተፈጥሮ ፕላስሲዶች ሰው ሰራሽ ግንባታ ዋና ዋና ገጽታዎች ምንድን ናቸው?
ተፈጥሯዊ ፕላስሚዶች ብዙ ጊዜ ጉድለቶች ስላሏቸው ለጄኔቲክ ምህንድስና ተሸካሚ ሆነው ለመጠቀም ተስማሚ አይደሉም፣ እና ተሻሽለው መገንባት አለባቸው፡ ሀ.እንደ ሁለት ወይም ከዚያ በላይ ያሉ ተስማሚ የመምረጫ ጠቋሚ ጂኖችን ይጨምሩ, ለመምረጥ ቀላል ናቸው, አብዛኛውን ጊዜ አንቲባዮቲክ ጂኖች.ለ.እንደገና መቀላቀልን ለማመቻቸት ተስማሚ የኢንዛይም መቁረጫ ቦታዎችን ይጨምሩ ወይም ይቀንሱ።ሐ.ርዝመቱን ያሳጥሩ, አላስፈላጊ ቁርጥራጮችን ይቁረጡ, የማስመጣት ቅልጥፍናን ያሻሽሉ እና የመጫን አቅም ይጨምሩ.መ.ቅጂውን ከጠባብ ወደ ልቅ፣ ከትንሽ ቅጂዎች ወደ ብዙ ቅጂዎች ይለውጡ።ሠ.በጄኔቲክ ምህንድስና ልዩ መስፈርቶች መሰረት ልዩ የጄኔቲክ ንጥረ ነገሮችን ይጨምሩ
4. ቲሹ-ተኮር ሲዲኤንኤ ልዩነትን ለማጣራት ዘዴን ምሳሌ ስጥ?
ሁለት የሴል ህዝቦች ይዘጋጃሉ, የታለመው ዘረ-መል (ጅን) በአንደኛው ሕዋስ ውስጥ ይገለጻል ወይም በከፍተኛ ደረጃ ይገለጻል, እና የታለመው ጂን በሌላኛው ሕዋስ ውስጥ አልተገለፀም ወይም ዝቅ አይልም, ከዚያም የዒላማው ጂን በማዳቀል እና በንፅፅር ተገኝቷል.ለምሳሌ፣ እብጠቶች በሚፈጠሩበት እና በሚዳብሩበት ወቅት፣ የቲሞር ሴሎች ኤምአርኤን ከተለመዱት ህዋሶች የተለያየ የመግለጫ ደረጃ ያላቸው ናቸው።ስለዚህ፣ ከዕጢ ጋር የተገናኙ ጂኖች በልዩነት ማዳቀል ሊመረመሩ ይችላሉ።የማስነሻ ዘዴው ገለጻቸው የሚቀሰቀስባቸውን ጂኖች ለማጣራት ሊያገለግል ይችላል።
5. የ hybridoma ሕዋስ መስመሮችን ማመንጨት እና ማጣራት?
የስፕሊን ቢ ሴሎች + ማይሎማ ሴሎች, የሴል ውህደትን ለማበረታታት ፖሊ polyethylene glycol (PEG) ይጨምሩ እና በ HAT መካከለኛ (hypoxanthine, aminopterin, T የያዙ) ውስጥ የበቀለው የስፕሊን B-myeloma ውህድ ሴሎች አመጋገብን ማስፋፋቱን ቀጥለዋል.የሕዋስ ውህደት የሚከተሉትን ያካትታል: ስፕሊን-ስፕሊን ውህደት ሴሎች: ማደግ አይችሉም, የስፕሊን ሴሎች በብልቃጥ ውስጥ ሊዳብሩ አይችሉም.የአጥንት-አጥንት ውህደት ሴሎች፡- ሃይፖክሳንታይን መጠቀም አይችሉም፣ነገር ግን ፎሌት ሬድዳቴሴስን በመጠቀም ፕዩሪንን በሁለተኛው መንገድ ማዋሃድ ይችላሉ።አሚኖፕተሪን ፎሌት ሬድዳሴስን ስለሚገድብ ማደግ አይችልም.የአጥንት-ስፕሊን ፊውዥን ሴሎች: በኮፍያ ውስጥ ማደግ ይችላሉ, የስፕሊን ሴሎች ሃይፖክሳንቲንን መጠቀም ይችላሉ, እና የአጥንት ሴሎች የሴል ክፍፍል ተግባርን ይሰጣሉ.
6. በዲዲኦክሲ ተርሚናል ማቋረጫ ዘዴ (Sanger method) የዲኤንኤ ቀዳሚ መዋቅር የመወሰን መርህ እና ዘዴ ምንድን ነው?
መርሆው የዲኤንኤ ማራዘሚያን ለማቋረጥ የኑክሊዮታይድ ሰንሰለት ተርሚነተር-2,,3-dideoxynucleotide መጠቀም ነው.ለ 3/5/phosphodiester bonds ምስረታ የሚያስፈልገው 3-OH ስለሌለው፣ ወደ ዲኤንኤ ሰንሰለት ከገባ በኋላ፣ የዲኤንኤ ሰንሰለት የበለጠ ሊራዘም አይችልም።በመሠረታዊ ማጣመር መርህ መሠረት ፣ ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ በመደበኛው የተራዘመ የዲ ኤን ኤ ሰንሰለት ውስጥ ለመሳተፍ dNMP በሚፈልግበት ጊዜ ሁሉ ሁለት እድሎች አሉ ፣ አንደኛው በ ddNTP ውስጥ መሳተፍ ነው ፣ ይህም የዲኦክሲኑክሊዮታይድ ሰንሰለት ማራዘሚያ መቋረጥ ያስከትላል ።ሌላው በዲኤንቲፒ ውስጥ መሳተፍ ነው፣ ስለዚህም የዲኤንኤ ሰንሰለቱ እስከሚቀጥለው ዲዲኤንቲፒ እስኪካተት ድረስ ይቀጥላል።በዚህ ዘዴ መሰረት በዲኤንቲፒ የሚጨርሱ የተለያየ ርዝመት ያላቸው የዲኤንኤ ቁርጥራጮች ቡድን ማግኘት ይቻላል.ዘዴው በቅደም ተከተል በአራት ቡድኖች ddAMP፣ ddGMP፣ ddCMP እና ddTMP መከፋፈል ነው።ከምላሹ በኋላ, ፖሊacrylamide gel electrophoresis በመዋኛ ባንዶች መሰረት የዲኤንኤ ቅደም ተከተል ማንበብ ይችላል.
7. የአክቲቪተር ፕሮቲን (ሲኤፒ) በጽሑፍ ቅጂ ላይ ያለው አወንታዊ ተጽእኖ ምንድነው?
ሳይክሊክ አዴኒሌት (cAMP) ተቀባይ ፕሮቲን CRP (cAMP receptor protein), በ CAMP እና CRP ጥምር የተገነባው ውስብስብ CAP (cAMPactivated protein) ይባላል.ኢ. ኮላይ በመካከለኛ የግሉኮስ እጥረት ውስጥ ሲበቅል ፣ የ CAP ውህደት ይጨምራል ፣ እና CAP እንደ ላክቶስ (ላክ) ያሉ አስተዋዋቂዎችን የማግበር ተግባር አለው።አንዳንድ የCRP-ጥገኛ አራማጆች የጋራ አራማጆች ያላቸው የተለመደ -35 የክልል ቅደም ተከተል ባህሪ (TTGACA) ይጎድላቸዋል።ስለዚህ, አር ኤን ኤ ፖሊመሬዜን ከእሱ ጋር ለማያያዝ አስቸጋሪ ነው.የ CAP (ተግባር) መኖር፡ የኢንዛይም እና አስተዋዋቂውን ትስስር በእጅጉ ሊያሻሽል ይችላል።በዋናነት የሚከተሉትን ሁለት ገጽታዎች ያሳያል፡- ① CAP የኢንዛይም ሞለኪውል የአስተዋዋቂውን መጣጣም እና ከኤንዛይም ጋር ያለውን መስተጋብር በመቀየር በትክክል አቅጣጫ እንዲይዝ ይረዳል፣ ይህም ከ -10 ክልል ጋር በማጣመር የ -35 ክልልን ተግባር የመተካት ሚና ይጫወታል።②CAP የአር ኤን ኤ ፖሊመሬዜሽን በዲ ኤን ኤ ውስጥ ካሉ ሌሎች ድረ-ገጾች ጋር መተሳሰርን ሊገታ ይችላል፣በዚህም ከተለየ አራማጅ ጋር የመተሳሰር እድልን ይጨምራል።
8. በተለመደው የዲ ኤን ኤ ዳግም ማጣመር ሙከራ ውስጥ ምን እርምጃዎች ይካተታሉ?
ሀ.የለጋሹን አካል ኢላማውን ዘረ-መል (ወይም ውጫዊ ጂን) ያውጡ እና ኢንዛይም በሆነ መልኩ ከሌላ ዲኤንኤ ሞለኪውል (ክሎኒንግ ቬክተር) ጋር በማገናኘት አዲስ የዲኤንኤ ሞለኪውል ይፈጥራል።ለ.የዲ ኤን ኤ ሞለኪውል ወደ ተቀባዩ ሴል ያስተላልፉ እና ይድገሙት እና በተቀባዩ ሕዋስ ውስጥ ያስቀምጡት።ይህ ሂደት ትራንስፎርሜሽን ይባላል።ሐ.ዳግም የተቀናጀውን ዲ ኤን ኤ የወሰዱትን ተቀባይ ህዋሶች ስክሪን እና ለይ።መ.የውጭ የእርዳታ ዘረ-መል መገለጡን ለማወቅ ድጋሚ ዲ ኤን ኤ የያዙ ህዋሶች የጅምላ ባህል።
9. የጂን ቤተመፃህፍት ግንባታ የድጋሚ አካላትን ለማጣራት ሶስት ዘዴዎች ተሰጥተዋል እና ሂደቱ በአጭሩ ተገልጿል.
የአንቲባዮቲክ መድሐኒት ምርመራ፣ የመቋቋም ወደ ውስጥ መግባት አለመቻል፣ ሰማያዊ-ነጭ ስፖት ወይም PCR ማጣሪያ፣ ልዩነት የማጣሪያ ምርመራ፣ የዲ ኤን ኤ ምርመራ አብዛኞቹ ክሎኒንግ ቬክተሮች አንቲባዮቲክ የመቋቋም ጂኖችን (አንቲ-አምፒሲሊን፣ tetracycline) ይይዛሉ።ፕላስሚድ ወደ ኢሼሪሺያ ኮላይ ሲተላለፍ ባክቴሪያዎቹ የመቋቋም ችሎታ ያገኛሉ, እና ሽግግር የሌላቸው ሰዎች መቋቋም አይችሉም.ግን እንደገና መደራጀቱን ወይም አለመደራጀቱን መለየት አይችልም።ሁለት የመቋቋም ጂኖች በያዘው ቬክተር ውስጥ፣ የውጭ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጭ ወደ አንዱ ጂኖች ውስጥ ገብቶ ጂን እንዲነቃነቅ ካደረገ፣ የተለያዩ መድኃኒቶችን የያዙ ሁለት የሰሌዳ ቁጥጥሮች አወንታዊ ድጋሚ አካላትን ለመመርመር መጠቀም ይቻላል።ለምሳሌ, pUC plasmid ሰማያዊ ለማምረት የ chromogenic substrate X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) መበስበስ የሚችል LacZ ጂን (ኢንኮዲንግ β-galactosidase) ይዟል.የውጭው ዲ ኤን ኤ ሲገባ, LacZ ጂን ሊገለጽ አይችልም, እና ውጥረቱ ነጭ ነው, ስለዚህም እንደገና የተዋሃዱ ባክቴሪያዎችን ለማጣራት.
10. ትራንስጀኒክ እንስሳትን በፅንስ ግንድ ሴሎች የማግኘት መሰረታዊ ሂደትን ያብራሩ?
የፅንስ ግንድ ሴሎች (ኢ.ኤስ.) በፅንሱ እድገት ወቅት የፅንስ ህዋሶች ሲሆኑ ሰው ሰራሽ በሆነ መንገድ ሊዳብሩ እና ሊባዙ የሚችሉ እና ከሌሎች የሕዋስ ዓይነቶች የመለየት ተግባር አላቸው።የ ES ሕዋሳት ባሕል፡ የ blastocyst የውስጠኛው ሴል ብዛት የተነጠለ እና የተመረተ ነው።ES ከመጋቢ ነፃ በሆነ ንብርብር ውስጥ ሲለማ፣ ወደ ተለያዩ ተግባራዊ ሴሎች ማለትም የጡንቻ ሴሎች እና ኤን ሴሎች ይለያል።ፋይብሮብላስት በያዘው መካከለኛ ክፍል ውስጥ ሲለማ፣ ES የልዩነት ተግባሩን ይጠብቃል።ES በጄኔቲክ ዘዴ ሊታከም ይችላል፣ እና የልዩነት ተግባሩ የልዩነት ተግባሩን ሳይነካ ሊዋሃድ ይችላል፣ ይህም የዘፈቀደ ውህደትን ችግር ይፈታል።ውጫዊ ጂኖችን ወደ ፅንስ ሴል ሴል በማስተዋወቅ እርጉዝ በሆኑት ሴት አይጦች ማህፀን ውስጥ በመትከል ወደ ቡችላነት በማደግ ግብረ-ሰዶማዊ አይጦችን ለማግኘት ይሻገራሉ።
