የቫይረስ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ማግለል ኪት የቫይረስ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ማውጣት የመንጻት ዝግጅት ኪትስ
ዝርዝሮች
50 መሰናዶዎች, 200 መሰናዶዎች
ቫይራል አር ኤን ኤ ኑክሊክ አሲድ ማጥራት የማግለል ኪት በForegene የተሰራውን ስፒን አምድ እና ፎርሙላ ይጠቀማል፣ ይህም ከፍተኛ ንፅህናን እና ከፍተኛ ጥራት ያለው የቫይረስ አር ኤን ኤ ከፕላዝማ፣ ሴረም፣ ከሴል ነፃ የሆነ የሰውነት ፈሳሽ እና የሴል ባህል ሱፐርናታንት ካሉ ናሙናዎች በብቃት ማውጣት ይችላል።ኪቱ በተለይ Linear Acrylamide ይጨምራል፣ ይህም በቀላሉ ከናሙናዎቹ አነስተኛ መጠን ያለው አር ኤን ኤ ይይዛል።አር ኤን ኤ-ብቻ አምድ አር ኤን ኤ በብቃት ማሰር ይችላል።ኪቱ ብዙ ቁጥር ያላቸውን ናሙናዎች በተመሳሳይ ጊዜ ማካሄድ ይችላል።
ሙሉው ስብስብ RNase አልያዘም, ስለዚህ የተጣራው አር ኤን ኤ አይበላሽም.Buffer viRW1 እና Buffer viRW2 የተገኘው ቫይራል ኑክሊክ አሲድ ከፕሮቲን፣ ኒውክሊየስ ወይም ሌሎች ቆሻሻዎች ነፃ መሆኑን ማረጋገጥ ይችላል፣ ይህም በቀጥታ ለታችኛው ሞለኪውላር ባዮሎጂ ሙከራዎች ሊያገለግል ይችላል።
Kit ክፍሎች
| ሊኒያር አሲሪላሚድ |
| ቋት DRL |
| ቋት RW1፣ ቋት RW2 |
| RNase-ነጻ ddH2O |
| ዲ ኤን ኤ/አር ኤን ኤ አምድ |
| መመሪያዎች |
ባህሪዎች እና ጥቅሞች
■ በክፍል ሙቀት (15-25 ℃) በጠቅላላው ሂደት፣ ያለ በረዶ መታጠቢያ እና ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ማእከላዊ አሰራር።
■ የተሟላ ኪት RNase-ነጻ፣ ስለ አር ኤን ኤ መበላሸት መጨነቅ አያስፈልግም።
■ ከፍተኛ የኒውክሊክ አሲድ ምርት፡ ዲ ኤን ኤ/አር ኤን ኤ-ብቻ አምድ እና ልዩ ቀመር ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ በብቃት ማጥራት ይችላል።
■ ትልቅ የናሙና የማቀነባበር አቅም፡ እስከ 200μl ናሙናዎች በእያንዳንዱ ጊዜ ሊሰራ ይችላል።
■ ፈጣን ፍጥነት፡ ለመስራት ቀላል እና በ20 ደቂቃ ውስጥ ሊጠናቀቅ ይችላል።
■ ደህንነት፡ ምንም ኦርጋኒክ ሬጀንት አያስፈልግም።
■ ከፍተኛ ጥራት፡- የተጣራው አር ኤን ኤ ስብርባሪዎች ከፍተኛ ንፅህና ያላቸው፣ ከፕሮቲን እና ከሌሎች ቆሻሻዎች የፀዱ እና የተለያዩ የታችኛውን የሙከራ መተግበሪያዎችን ማሟላት ይችላሉ።
Kit መተግበሪያ
እንደ ፕላዝማ፣ ሴረም፣ ሴል-ነጻ የሰውነት ፈሳሽ እና የሴል ባህል ሱፐርናታንት ባሉ ናሙናዎች ውስጥ የቫይራል ኑክሊክ አሲድ ለማውጣት እና ለማጣራት ተስማሚ ነው።
የስራ ፍሰት
ሥዕላዊ መግለጫ
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
■ ይህ ኪት ለ 24 ወራት በደረቅ ሁኔታ በክፍል ሙቀት (15-25 ℃) ውስጥ ሊከማች ይችላል;ረዘም ላለ ጊዜ ማከማቸት ካስፈለገ በ 2-8 ℃ ውስጥ ሊከማች ይችላል.
■ Linear Acrylamide መፍትሄ በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ 7 ቀናት ሊከማች ይችላል;እቃውን ከተቀበሉ በኋላ እባክዎን አውጥተው በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ያስቀምጡት.
■ Linear Acrylamide ወደ Buffer DRL ከጨመረ በኋላ በ2-8°C እስከ 48 ሰአት ሊከማች ይችላል።እባክዎን የተዘጋጀውን መፍትሄ ይጠቀሙ።
የችግር ትንተና መመሪያ
የሚከተለው ለሙከራዎችዎ አጋዥ እንደሚሆን ተስፋ በማድረግ በቫይረስ ዲ ኤን ኤ/ኤን ኤ ሲወጣ ሊያጋጥሙ የሚችሉ ችግሮች ትንታኔ ነው።በተጨማሪም፣ ከኦፕሬሽን መመሪያዎች እና የችግር ትንተና ውጪ ለሌሎች የሙከራ ወይም ቴክኒካል ችግሮች፣ እርስዎን ለመርዳት የቴክኒክ ድጋፍ ሰጥተናል።ማንኛውም ፍላጎት ካለዎት እባክዎ ያነጋግሩን፡ 028-83360257 ወይም ኢሜል፡-
Tech@foregene.com.
ምንም ኑክሊክ አሲድ ማውጣት ወይም ዝቅተኛ ኑክሊክ አሲድ ምርት
ብዙውን ጊዜ የመልሶ ማግኛ ቅልጥፍናን የሚነኩ ብዙ ምክንያቶች አሉ, ለምሳሌ: የናሙና ኑክሊክ አሲድ ይዘት, የአሠራር ዘዴ, የኤሌክትሮል መጠን, ወዘተ.
የተለመዱ መንስኤዎች ትንተና;
1. በሂደቱ ውስጥ የበረዶ መታጠቢያ ወይም ዝቅተኛ የሙቀት መጠን (4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ) ማእከላዊ ተካሂዷል.
አስተያየት: በጠቅላላው ሂደት በክፍል ሙቀት (15-25 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ) ውስጥ ይስሩ, የበረዶ ገላ መታጠቢያ እና ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ማእከላዊ አያድርጉ.
2. ናሙናው በትክክል ተከማችቷል ወይም ናሙናው ለረጅም ጊዜ ተከማችቷል.
ምክር: ናሙናዎችን በ -80 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ያከማቹ እና ተደጋጋሚ ማቀዝቀዝ እና ማቅለጥ;ኑክሊክ አሲድ ለማውጣት አዲስ የተሰበሰቡ ናሙናዎችን ለመጠቀም ይሞክሩ።
3. በቂ ያልሆነ ናሙና lysis.
የውሳኔ ሃሳብ፡ እባኮትን ናሙና እና የሊሲስ ስራ መፍትሄ በደንብ ተቀላቅለው በክፍል ሙቀት (15-25°C) ለ10 ደቂቃ መከተላቸውን ያረጋግጡ።
4. የ eluent የተሳሳተ መጨመር.
አስተያየት፡ ከRNase-ነጻ ddH2O ጠብታ አቅጣጫ ወደ የመንጻት አምድ ገለፈት መሃል መጨመሩን ያረጋግጡ እና በንጽህና አምድ ቀለበት ላይ አይጣሉት።
5. ትክክለኛው የኢታኖል መጠን ወደ Buffer RW2 አልተጨመረም።
አስተያየት፡ እባክዎን መመሪያዎቹን ይከተሉ፣ ትክክለኛውን የኢታኖል መጠን ወደ Buffer RW2 ያክሉ እና ኪቱን ከመጠቀምዎ በፊት በደንብ ይቀላቀሉ።
6. ተገቢ ያልሆነ የናሙና መጠን.
የአስተያየት ጥቆማ፡ 200µl ናሙና ለእያንዳንዱ 500µl Buffer DRL ይካሄዳል።ከመጠን በላይ የናሙና ማቀነባበር ዝቅተኛ የኒውክሊክ አሲድ ምርትን ያመጣል.
7. ተገቢ ያልሆነ የኤሌክትሮማግኔቲክ መጠን ወይም ያልተሟላ ቅልጥፍና.
ምክር: የመንጻቱ አምድ የኤሌክትሮል መጠን 30-50μl;የማብራሪያው ውጤት አጥጋቢ ካልሆነ ቀድሞ በማሞቅ RNase-Free ddH2O ለምሳሌ 5-10min ከተጨመረ በኋላ በክፍል ሙቀት ውስጥ ጊዜውን ለማራዘም ይመከራል.
8. ኤታኖል በ Buffer RW2 ከታጠበ በኋላ አምድ ላይ ይቀራል።
አስተያየት፡- ኢታኖል በ Buffer RW2 ሴንትሪፉግ ከተሰራ በኋላ ለ2 ደቂቃዎች የሚቆይ ከሆነ፣ ከሴንትሪፍግግግ በኋላ ዓምዱ በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ5 ደቂቃ ያህል ቀሪውን ኢታኖልን ሙሉ በሙሉ ለማስወገድ ያስችላል።
የተጣራው ኑክሊክ አሲድ ተበላሽቷል
የተጣራው ኑክሊክ አሲድ ጥራት ከናሙና, ከ RNase ብክለት, ከኦፕሬሽን እና ከሌሎች ነገሮች ጥበቃ ጋር የተያያዘ ነው.የተለመዱ መንስኤዎች ትንተና;
1. የተሰበሰቡት ናሙናዎች በጊዜ ውስጥ አልተቀመጡም.
አስተያየት: ናሙናው ከተሰበሰበ በኋላ በጊዜ ውስጥ ጥቅም ላይ ካልዋለ, እባክዎን በ -80 ° ሴ ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ወዲያውኑ ያከማቹ.ለአር ኤን ኤ ማውጣት፣ አዲስ የተሰበሰቡ ናሙናዎችን ለመጠቀም ይሞክሩ።
2. ናሙናዎችን ይሰብስቡ እና ያቀዘቅዙ እና በተደጋጋሚ ይቀልጡ.
አስተያየት: ናሙናዎችን በሚሰበስቡበት እና በሚከማቹበት ጊዜ ቅዝቃዜን እና ማቅለጥ (ከአንድ ጊዜ በላይ) ያስወግዱ, አለበለዚያ የኒውክሊክ አሲድ ምርት ይቀንሳል.
3. RNase በቀዶ ጥገና ክፍል ውስጥ ገብቷል ወይም ሊጣሉ የሚችሉ ጓንቶች, ጭምብሎች, ወዘተ ... አይለብሱም.
የውሳኔ ሃሳብ፡ የአር ኤን ኤ ማውጣት ሙከራዎች በተለየ የአር ኤን ኤ ኦፕሬሽን ክፍል ውስጥ በተሻለ ሁኔታ ይከናወናሉ፣ እና ከሙከራው በፊት የላብራቶሪ ጠረጴዛው መጽዳት አለበት።
በሙከራው ወቅት አር ኤንአዝ በከፍተኛ መጠን በማስተዋወቅ ምክንያት የሚፈጠረውን የአር ኤን ኤ መበላሸትን ለማስወገድ በሙከራው ወቅት የሚጣሉ ጓንቶች እና ጭንብል ያድርጉ።
4. ጥቅም ላይ በሚውልበት ጊዜ ሬጀንቱ በ RNase ተበክሏል.
ምክር፡ ለተዛማጅ ሙከራዎች በአዲስ የቫይረስ ዲ ኤን ኤ/ኤን ኤ ማግለል ኪት ይተኩ።
5. ለአር ኤን ኤ መጠቀሚያ ጥቅም ላይ የሚውሉት የሴንትሪፉጅ ቱቦዎች እና የ pipette ምክሮች በ RNase ተበክለዋል.
የአስተያየት ጥቆማ፡ ለአር ኤን ኤ ለማውጣት ጥቅም ላይ የሚውሉት ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች፣ pipette ምክሮች፣ pipettes ወዘተ ሁሉም ከአር ናስ-ነጻ መሆናቸውን ያረጋግጡ።
የተጣራ ኑክሊክ አሲድ በታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል።
ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ በንጽህና አምድ የተጣራ፣ የጨው ion እና የፕሮቲን ይዘቱ በጣም ከፍተኛ ከሆነ፣ የታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች ላይ ተጽእኖ ይኖረዋል፣ ለምሳሌ፡ PCR ማጉላት፣ መገለባበጥ፣ ወዘተ.
1. የተለቀቀው ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ቀሪ የጨው ions አሏቸው።
አስተያየት፡ ትክክለኛው የፍፁም ኢታኖል መጠን ወደ Buffer RW2 መጨመሩን ያረጋግጡ እና የመንፃቱን አምድ ሁለት ጊዜ በአሰራር መመሪያው ውስጥ በተገለፀው የሴንትሪፍግሽን ፍጥነት ይታጠቡ።የጨው ion ብክለትን ለመቀነስ ሴንትሪፍግሽን ያከናውኑ።
2. የወጣው ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ኤታኖል ቅሪቶች አሏቸው።
አስተያየት: በ Buffer RW2 መታጠብን ካረጋገጡ በኋላ, በክወና መመሪያው ውስጥ በሴንትሪፍግሽን ፍጥነት ባዶ ቱቦ ሴንትሪፍግሽን ያከናውኑ;አሁንም የኢታኖል ቅሪት ካለ፣ ባዶውን ቱቦ ሴንትሪፉል በማድረግ ለ 5 ደቂቃ በክፍል ሙቀት ውስጥ በማስቀመጥ የኢታኖል ቅሪትን በከፍተኛ መጠን ማስወገድ ይችላሉ።
መመሪያ መመሪያዎች፡-
የቫይረስ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ማግለል ኪት መመሪያ መመሪያ
