የዕፅዋት ዲ ኤን ኤ ማግለል ኪት ጂኖሚክ ተክል ዲ ኤን ኤ የመንጻት ኪትስ Reagents ፕሮቶኮል
ዝርዝሮች
50 መሰናዶዎች, 100 መሰናዶዎች, 250 መሰናዶዎች
ይህ ኪት ዲ ኤን ኤ፣ Foregene protease እና ልዩ የሆነ ቋት ሲስተም ማሰር የሚችል ዲ ኤን ኤ-ብቻ አምድ ይጠቀማል፣ ይህም የእጽዋት ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ማጽዳትን በእጅጉ ያቃልላል።ከፍተኛ ጥራት ያለው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ በ 30 ደቂቃዎች ውስጥ ሊገኝ ይችላል, ይህም የጂኖም ዲ ኤን ኤ መበላሸትን ያስወግዳል.
በዲ ኤን ኤ ብቻ ያለው የሲሊካ ጄል ሽፋን በአከርካሪው አምድ ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውለው የForegene ልዩ የሆነ አዲስ ቁሳቁስ ነው ፣ እሱም በብቃት እና ከዲ ኤን ኤ ጋር የተቆራኘ ፣ እና አር ኤን ኤ ፣ ንፁህ ያልሆኑ ፕሮቲኖችን ፣ ionዎችን ፣ ፖሊዛክካርዳይድን ፣ ፖሊፊኖሎችን እና ሌሎች ኦርጋኒክ ውህዶችን በከፍተኛ ሁኔታ ማስወገድ ይችላል።
የምርት ክፍሎች
| Buffer PL1፣ Buffer PL2 |
| Buffer PW፣ Buffer WB፣ Buffer EB |
| Foregene Protease |
| ዲ ኤን ኤ-ብቻ አምድ |
| መመሪያዎች |
ባህሪዎች እና ጥቅሞች
■ የአር ኤን ኤ መበከል የለም፡ በመሳሪያው የቀረበው ዲ ኤን ኤ ብቻ አምድ በሙከራ ጊዜ ያለ ተጨማሪ RNase አር ኤን ኤን ከጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማስወገድ ያስችላል፣ ይህም ላቦራቶሪው በውጫዊ አር ናስ እንዳይበከል ይከላከላል።
■ ፈጣን ፍጥነት፡ Foregene Protease ከተመሳሳይ ፕሮቲን ከፍ ያለ እንቅስቃሴ ያለው እና የቲሹ ናሙናዎችን በፍጥነት ያፈጫል።
■ ቀላል፡ የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ የማውጣት ስራ በ30 ደቂቃ ውስጥ ሊጠናቀቅ ይችላል።
∎ ምቹ፡ ሴንትሪፉግሽን የሚካሄደው በክፍል ሙቀት ውስጥ ነው፣ ምንም 4℃ ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ያለው ሴንትሪፉግ ወይም የኤታኖል የዲኤንኤ ዝናብ አያስፈልግም።
■ ደህንነት፡ ምንም ኦርጋኒክ ሬጀንት አያስፈልግም።
∎ ከፍተኛ ጥራት፡- የተጣራው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትላልቅ ቁርጥራጭ፣ አር ኤን ኤ፣ አር ኤንኤስ የሌለው እና እጅግ በጣም ዝቅተኛ ion ይዘት ያለው ሲሆን የተለያዩ ሙከራዎችን መስፈርቶች ማሟላት ይችላል።
Kit መተግበሪያ
የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ አዲስ ወይም የቀዘቀዙ የእፅዋት ቲሹዎች ለማውጣት እና ለማጣራት ተስማሚ።
የስራ ፍሰት
ሥዕላዊ መግለጫ
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
ኪቱ ለ12 ወራት በክፍል ሙቀት (15-25 ℃) እና 2–8℃ ለረጅም ጊዜ ሊከማች ይችላል።
Foregene Protease Plus መፍትሄ ለረጅም ጊዜ (3 ወራት) በክፍል ሙቀት ውስጥ ሲከማች የሚሠራ ልዩ ቀመር አለው;በሚከማችበት ጊዜ እንቅስቃሴው እና መረጋጋት የተሻለ ይሆናል።4℃, ስለዚህ በ 4 ℃ ላይ ማከማቸት ይመከራል, በ -20 ℃ ላይ እንዳታከማቹ ያስታውሱ.
የችግር ትንተና መመሪያ
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
ዝቅተኛ ምርት ወይም ዲ ኤን ኤ የለም
ብዙውን ጊዜ የናሙናውን ምንጭ፣ የናሙናውን ዕድሜ፣ የናሙናውን የማከማቻ ሁኔታ እና አሠራሩን ጨምሮ በጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ምርት ላይ ተጽዕኖ የሚያደርጉ ብዙ ምክንያቶች አሉ።
ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ በሚወጣበት ጊዜ ሊገኝ አልቻለም
1. የቲሹ ናሙናዎች በአግባቡ ሳይቀመጡ ወይም ለረጅም ጊዜ ተከማችተዋል, በዚህም ምክንያት የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ መበላሸት ያስከትላል.
ምክር፡ የቲሹ ናሙናዎችን በፈሳሽ ናይትሮጅን ወይም -20 ውስጥ ያከማቹ°ሐ;ለጂኖም ዲ ኤን ኤ ለማውጣት አዲስ የተሰበሰቡ ናሙናዎችን ለመጠቀም ይሞክሩ።
2. በጣም ትንሽ የናሙና መጠን ተመጣጣኝ ጂኖም ዲ ኤን ኤ እንዳይወጣ ሊያደርግ ይችላል።
አስተያየት፡- ለረጅም ጊዜ የተከማቹ ቲሹ ናሙናዎች ወይም ከፍተኛ የጂኖም ዲ ኤን ኤ መበስበስ ላጋጠማቸው፣ ብዙ የጂኖም ዲ ኤን ኤ ለማውጣት የቲሹ ናሙናዎችን መጠን በትክክል መጨመር ይቻላል።የናሙናው መጠን በዲኤንኤው ፍላጎት መሰረት ሊወሰን ይችላል, ነገር ግን ትኩስ ናሙና ከ 100mg መብለጥ የለበትም, እና ደረቅ ናሙና ከ 30mg መብለጥ የለበትም.
3. ናሙናው በፈሳሽ ናይትሮጅን አልተፈጨም ወይም ከፈሳሽ ናይትሮጅን በኋላ ለረጅም ጊዜ አይቀመጥም.
አስተያየት: በዲ ኤን ኤ በሚወጣበት ጊዜ ናሙናው የሕዋስ ግድግዳውን ለመስበር በፈሳሽ ናይትሮጅን ሙሉ በሙሉ መፍጨት አለበት;ከተፈጨ በኋላ እባክዎን የናሙና ዱቄቱን በ 65 ቀድሞ በማሞቅ ወደ PL1 ያስተላልፉ°C በተቻለ ፍጥነት (የመሬቱ ዱቄት ከቀለጠ በኋላ የጂኖም ዲ ኤን ኤ በፍጥነት ማሽቆልቆል ይጀምራል) .
4. የ Foregene Protease ትክክለኛ ያልሆነ ማከማቻ የተቀነሰ ወይም ያልተነቃነቀ እንቅስቃሴን ያስከትላል።
ምክር፡ የForegene Protease ማከማቻ ሁኔታዎችን ያረጋግጡ ወይም በአዲስ ፎርጂን ፕሮቴይዝ ለኤንዛይም ሃይድሮሊሲስ ይተኩ።
5. ኪቱ በአግባቡ ባልተከማቸ ወይም ለረጅም ጊዜ ተከማችቷል፣ ይህም በመሳሪያው ውስጥ ያሉ አንዳንድ ክፍሎች እንዲወድቁ ያደርጋል።
ምክር፡ ለተዛማጅ ስራዎች አዲስ የእፅዋት ጂኖሚክ ዲኤንኤ ማውጣት ኪት ይግዙ።
6. ኪት አላግባብ መጠቀም.
የአስተያየት ጥቆማ፡- የዕፅዋት ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማውጣት እና ለማጣራት ለናሙናዎች የተዘጋጀ የእፅዋት ዲኤንኤ ማግለያ ኪት ይግዙ።
7. ቋት WB ሀ ሳይጨምርውሃ የማይጠጣ ኢታኖል.
ምክር፡ ትክክለኛውን የኢታኖል መጠን ወደ Buffer WB ማከልዎን ያረጋግጡ።
8. ኤሊየንት በሲሊካ ሽፋን ላይ በትክክል አልተንጠባጠበም.
የአስተያየት ጥቆማ፡- ቀድሞ የተሞቀውን ኤሉየንት በ65 ያክሉ℃ወደ ሲሊካ ጄል ሽፋን መሃከል ዝቅ ይበሉ እና ለ 5 ደቂቃዎች በቤት ሙቀት ውስጥ ይተዉት እና የመለጠጥ ቅልጥፍናን ለመጨመር።
ዝቅተኛ ምርት ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማግኘት ማውጣት
1. ናሙናው አግባብ ባልሆነ መንገድ ተከማችቷል ወይም ለረጅም ጊዜ ተከማችቷል, በዚህም ምክንያት የጂኖም ዲ ኤን ኤ መበላሸት ያስከትላል.
ምክር፡ የቲሹ ናሙናዎችን በ -20 ያከማቹ℃;ለጂኖም ዲ ኤን ኤ ለማውጣት አዲስ የተሰበሰቡ የቲሹ ናሙናዎችን ለመጠቀም ይሞክሩ።
2. የቲሹ ናሙናዎች መጠን በጣም ትንሽ ከሆነ, የሚወጣው ጂኖም ዲ ኤን ኤ ያነሰ ይሆናል.
አስተያየት: አንዳንድ የእፅዋት ናሙናዎች በውሃ ውስጥ የበለፀጉ ናቸው, ለምሳሌ የውሃ ውስጥ ተክሎች እንደ አልጌ, ወዘተ., መጠኑ በትክክል ሊጨምር ወይም ውሃው ከቀዶ ጥገናው ትንሽ ቀደም ብሎ ሊደርቅ ይችላል.
3. ናሙናዎቹ በፈሳሽ ናይትሮጅን በደንብ አልተፈጨም ወይም ከተፈጨ በኋላ በክፍል ሙቀት ውስጥ ለረጅም ጊዜ እንዲቆይ ተደርጓል.
አስተያየት: ፈሳሽ ናይትሮጅን መፍጨት በቂ መሆን አለበት, እና ናሙና የሕዋስ ግድግዳ በተቻለ መጠን መሰበር አለበት;ከተፈጨ በኋላ ወዲያውኑ የናሙና ዱቄት ወደ 65 መዛወር አለበት℃ለቀጣዩ እርምጃ ቀድመው የሚሞቅ Buffer PL1።
4. ትክክለኛውን ኪት አለመጠቀም.
ምክር፡ የእፅዋትን ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማውጣት እና ለማጣራት የተለየ የእፅዋት ዲኤንኤ ማግለያ ኪት ይጠቀሙ።
5. የ Foregene Protease ትክክለኛ ያልሆነ ማከማቻ የተቀነሰ ወይም ያልተነቃነቀ እንቅስቃሴን ያስከትላል።
ምክር፡ የForegene Protease ማከማቻ ሁኔታዎችን ያረጋግጡ ወይም በአዲስ ፎርጂን ፕሮቴይዝ ለኤንዛይም ሃይድሮሊሲስ ይተኩ።
6. የኤሌትሪክ ችግር
ምክር፡ እባክዎን ለማብራራት Buffer EB ይጠቀሙ።ddH የሚጠቀሙ ከሆነ2ኦ ወይም ሌሎች ኤለመንቶች፣ የኤሌክትሮኒካዊው pH ከ7.0-8.5 መካከል መሆኑን ያረጋግጡ።
7. ኤሉኤንት በትክክል አልተንጠባጠበም
የአስተያየት ጥቆማ፡ እባኮትን የኤሉሽን ጠብታ ወደ ሲሊካ ገለባ መሃከል ጨምሩ እና በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ5 ደቂቃ ይተዉት
8. የኤሌክትሮል መጠን በጣም ትንሽ ነው
የአስተያየት ጥቆማ፡ እባክዎን በመመሪያው መሰረት ለጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ኤሊሽን ይጠቀሙ ቢያንስ ከ100 በታችμl.
ከዝቅተኛ ንፅህና ጋር የወጣ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ
የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ዝቅተኛ ንፅህና ወደ ታች የተፋሰሱ ሙከራዎች ውድቀት ወይም ደካማ ውጤት ያስከትላል፣ ለምሳሌ፡ ኢንዛይሙ ሊቆረጥ አይችልም፣ እና የታለመው የጂን ቁራጭ በ PCR ሊገኝ አይችልም።
1. የተለያዩ የፕሮቲን ብክለት, አር ኤን ኤ መበከል.
ትንታኔ: Buffer PW ዓምዱን ለማጠብ ጥቅም ላይ አልዋለም;Buffer PW ዓምዱን በትክክለኛው ማዕከላዊ ፍጥነት ለማጠብ ጥቅም ላይ አልዋለም ነበር።
አስተያየት: በአምዱ ውስጥ ከመጠን በላይ በሚተላለፍበት ጊዜ ከመጠን በላይ ዝናብ አለመኖሩን ለማረጋገጥ ይሞክሩ;በመመሪያው መሠረት የመንጻቱን አምድ በ Buffer PW ማጠብዎን ያረጋግጡ ፣ እና ይህ ደረጃ መተው አይቻልም።
2. የንጽሕና ion ብክለት.
ትንታኔ፡ የ Buffer WB ማጠቢያ አምድ ተትቷል ወይም አንድ ጊዜ ብቻ ታጥቧል፣ ይህም ቀሪ ionክ መበከልን አስከተለ።
ምክር፡ በተቻለ መጠን ቀሪ ionዎችን ለማስወገድ በተሰጠው መመሪያ መሰረት በBuffer WB ሁለት ጊዜ መታጠብዎን ያረጋግጡ።
3. RNase መበከል.
ትንተና፡ Exogenous RNase ወደ ቋት ተጨምሯል።በ Buffer PW ውስጥ ትክክል ያልሆነ የማጠብ ክዋኔ ቀሪ RNaseን ያስከትላል እና እንደ በብልቃጥ ግልባጭ ያሉ የታችኛው ኤን ኤ የሙከራ ስራዎች ላይ ተጽእኖ ያሳድራል።
የአስተያየት ጥቆማ፡ Foregene ተከታታይ ኑክሊክ አሲድ የማውጣት ኪት ያለ ተጨማሪ RNase አር ኤን ኤ ሊያስወግድ ይችላል፣ እና በፕላንት ዲኤንኤ ማግለል ኪት ውስጥ ያሉ ሁሉም ሬጀንቶች RNase አያስፈልጋቸውም።በመመሪያው መሠረት የመንጻቱን አምድ በ Buffer PW ማጠብዎን ያረጋግጡ ፣ እና ይህ ደረጃ መተው አይቻልም።
4. የኢታኖል ቅሪቶች.
ትንታኔ፡ የመንፃቱን አምድ በBuffer WB ከታጠበ በኋላ ባዶ ቱቦ ሴንትሪፍግሽን አልተሰራም።
ምክር፡ ለትክክለኛው ባዶ ቱቦ ሴንትሪፍግሽን መመሪያዎችን ይከተሉ።
መመሪያ መመሪያ፡
የእፅዋት ዲ ኤን ኤ ማግለል ኪት መመሪያ መመሪያ
