• ፌስቡክ
  • linkin
  • youtube

የ A260/A230 ዝቅተኛ ሬሾ ብዙውን ጊዜ ከፍተኛው የመጠጫ የሞገድ ርዝመት 230nm ባላቸው ቆሻሻዎች ይከሰታል።እነዚህ ቆሻሻዎች ምን እንደሚያካትቱ እንይ፡-

  • የተለመዱ ብክለት

    የመምጠጥ የሞገድ ርዝመት

    የውጤት ውጤት

    ፕሮቲን

    ~ 230nm እና 280nm

    በተመሳሳይ ጊዜ የ A260/A 280እና ኤ260/A 280ሬሾዎች

    የጓኒዲን ጨው

    220-240 nm

    የ A ን ይቀንሱ260/A 280ጥምርታ

    ፌኖል

    ~ 270 nm

    -

    ትሪዞል

    ~ 230nm እና 270nm

    የ A ን ይቀንሱ260/A 280ጥምርታ

    ኢዲቲኤ

    ~ 230 nm

    የ A ን ይቀንሱ260/A 280ጥምርታ

    ኢታኖል

    230-240 nm

    የ A ን ይቀንሱ260/A 280ጥምርታ

 
 
 
የተለመዱ ብክሎች የመምጠጥ የሞገድ ርዝመት እና የንፅፅር እሴት

Pየሮቲን ብክለት
የፕሮቲን ብክለት በኒውክሊክ አሲድ የማውጣት ሂደት ውስጥ በጣም የተለመደው ብክለት ተደርጎ ሊወሰድ ይችላል።ፕሮቲን ከላይኛው የውሃ ክፍል እና የታችኛው ክፍል መካከል ይገኛልኦርጋኒክደረጃ .ብክለት የA260/A280 እና A260/A230 ጥምርታ በተመሳሳይ ጊዜ ይቀንሳል፣ እና የA260/A230 ጥምርታ ከA260/A280 ጥምርታ የበለጠ ግልፅ ይሆናል።
በቀጣዮቹ ጊዜያትየተገላቢጦሽ ግልባጭor qPCR ምላሾች, የፕሮቲን ቅሪቶች የኢንዛይም ተግባርን ሊገታ ወይም ሊያደናቅፉ ይችላሉ።.የፕሮቲን ብክለትን ለማስወገድ በጣም ጥሩው መንገድ የሱፐርኔታንትን በሚፈልጉበት ጊዜ "ከመጠን ያነሰ, ትንሽ መጠን ብዙ ጊዜ" የሚለውን መርህ ግምት ውስጥ ማስገባት ነው.

2. የጓኒዲኒየም ብክለት
hydrochloride (GuHCl) እና Guanidine thiocyanate (GTC) ፕሮቲኖችን የመደንዘዝ ውጤት አላቸው፣ ይህም በኑክሊክ አሲድ የመውጣት ሂደት ውስጥ የሕዋስ ሽፋንን በፍጥነት ያጠፋል፣ ይህም የፕሮቲን እጥረት እና ዝናብ ያስከትላል።የGuHCl እና GTC የመጠጣት የሞገድ ርዝመት ከ220-240 nm ነው፣ እናቀሪው የጉዋኒዲኒየም ጨው የ A260/A230 ጥምርታን ይቀንሳል.ምንም እንኳን ቀሪው የጉዋኒዲኒየም ጨው ሬሾውን ቢቀንስምበታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች ላይ ያለው ተጽእኖ እዚህ ግባ የሚባል አይደለም።.

3. ትራይዞል መበከል
የ Trizol ዋናው አካል phenol ነው.የ phenol ዋና ተግባር ሴሎችን መልቀቅ እና ፕሮቲኖችን እና ኑክሊክ አሲድ ንጥረ ነገሮችን በሴሎች ውስጥ መልቀቅ ነው።ምንም እንኳን ፌኖል ፕሮቲኖችን ውጤታማ በሆነ መንገድ መፍታት ቢችልም የ RNase እንቅስቃሴን ሙሉ በሙሉ መግታት አይችልም።ስለዚህ, 8 -hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, ወዘተ ወደ TRIzol ተጨምረዋል ውስጣዊ እና ውጫዊ RNase.
ሴሉላር አር ኤን ኤ በሚወጣበት ጊዜ ትሪዞል ሴሎቹን በፍጥነት ሊይዝ እና ከሴሎች የሚወጣውን ኒውክሊየስ ሊገታ ይችላል ፣ እና ቀሪው ትሪዞል የ A260/A230 ሬሾን በእጅጉ ይቀንሳል።
የማቀነባበሪያ ዘዴ: ሴንትሪፉግ በሚደረግበት ጊዜ, በትሪዞል ውስጥ ያለው phenol በ 4 ° እና በክፍል ሙቀት ውስጥ በውሃ ውስጥ በቀላሉ ሊሟሟ የሚችል መሆኑን ልብ ሊባል ይገባል.

4. የኢታኖል ቅሪት
ኤታኖል ከዲኤንኤ ጋር ሊገናኙ የሚችሉ የጨው ionዎችን በማሟሟት በመጨረሻው ሂደት ውስጥ ዲኤንኤውን ለማፍሰስ ይጠቅማል።የከፍተኛው የመሳብ ሞገድ ርዝመትየመምጠጥ ጫፍኤታኖል ደግሞ 230-240 nm ነው, ይህምእንዲሁም የA260/A230 ጥምርታ ይቀንሳል.
የኤታኖል ቅሪትን የማስወገድ ዘዴ በመጨረሻው ኤሌቴሽን ወቅት ሁለት ጊዜ ሊደገም ይችላል, በ ውስጥ ይነፍስጭስ መሰብሰብያኤታኖል ለኤሌትዩሽን ቋት ከመጨመራቸው በፊት ለሁለት ደቂቃዎች ሙሉ በሙሉ እንዲተን ለማድረግ።
ሆኖም፣ ሬሾው የአር ኤን ኤ ጥራት መገምገሚያ ጠቋሚ ብቻ እንደሆነ መታወቅ አለበት።ከላይ የተገለጹት ክዋኔዎች ጥብቅ ቁጥጥር ካደረጉ, በሬሾው እና በመደበኛ ክልል መካከል ያለው ልዩነት በታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች ላይ ትልቅ ተጽእኖ አይኖረውም.
ተዛማጅ ምርቶች፡
የእንስሳት ጠቅላላ አር ኤን ኤ ማግለል ስብስብ
የእፅዋት ጠቅላላ አር ኤን ኤ ማግለል ስብስብ
የሕዋስ ጠቅላላ አር ኤን ኤ ማግለል ስብስብ
የእፅዋት ጠቅላላ አር ኤን ኤ ማግለል ኪት ፕላስ


የልጥፍ ሰዓት፡- ፌብሩዋሪ-10-2023