1. የአር ኤን ኤ መፍትሄ መሳብን ፈልግ
በ 280, 320, 230, እና 260 nm መምጠጥ የኒውክሊክ አሲድ, የጀርባ (የመፍትሄ ድፍረትን), የጨው ክምችት እና እንደ ፕሮቲን ያሉ ኦርጋኒክ ቁሶችን ይወክላል.በአጠቃላይ OD260/OD280 (ሬሾ፣ አር) ብቻ ይመልከቱ።በ 1.8 ~ 2.0 ጊዜ, በአር ኤን ኤ ውስጥ የፕሮቲን ወይም ሌሎች ኦርጋኒክ ቁስ አካላትን መበከል መቋቋም ይቻላል ብለን እናስባለን, ነገር ግን ትሪስ መምጠጥን ለመለየት እንደ ቋት ጥቅም ላይ ሲውል የ R ዋጋ ከ 2 በላይ ሊሆን እንደሚችል ልብ ሊባል ይገባል (በአጠቃላይ <2.2 መሆን አለበት).መቼ R<1.8, በመፍትሔው ውስጥ የፕሮቲን ወይም ሌላ የኦርጋኒክ ቁስ አካል ብክለት የበለጠ ግልጽ ነው, እና የ RNA እጣ ፈንታ እንደ ፍላጎቶች ሊወሰን ይችላል.R> 2.2 በሚሆንበት ጊዜ አር ኤን ኤ ወደ ነጠላ ኑክሊክ አሲድ ሃይድሮላይዝድ ተደርጓል ማለት ነው።
2. የ ኤን ኤ ኤሌክትሮፊዮቲክ ንድፍ
በጥቅሉ ዲንቴሪንግ ጄል ለአር ኤን ኤ ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ጥቅም ላይ ይውላል፣ ነገር ግን የአር ኤን ኤ ጥራትን ለመለየት ብቻ ከሆነ፣ ጄል ማስፈንጠር አያስፈልግም፣ እና ተራ አጋሮዝ ጄል መጠቀም ይቻላል።የኤሌክትሮፊዮሬሲስ አላማ የ28S እና 18S ባንዶችን እና ጥምርታቸዉን ወይም የኤምአርኤን ስሚርን ትክክለኛነት መለየት ነው።በአጠቃላይ የ 28S እና 18S ባንዶች ብሩህ፣ ግልጽ እና ሹል ከሆኑ (የባንዶች ጠርዝ ግልጽ ከሆኑ) እና የ28S ብሩህነት ከ18S ባንድ እጥፍ በላይ ከሆነ የ RNA ጥራት ጥሩ እንደሆነ እንቆጥረዋለን።
ከላይ ያሉት በተለምዶ የምንጠቀማቸው ሁለቱ ዘዴዎች ናቸው ነገርግን ከነዚህ ሁለቱ ዘዴዎች አንዳቸውም በአር ኤን ኤ መፍትሄ ውስጥ ቀሪ RNase እንዳለ በግልፅ ሊነግሩን አይችሉም።በመፍትሔው ውስጥ በጣም ትንሽ የሆነ የ RNase መጠን ካለ, ከላይ በተጠቀሰው ዘዴ ለመለየት አስቸጋሪ ነው, ነገር ግን አብዛኛዎቹ poslednыh эnzymatycheskyh ምላሾች ከ 37 ዲግሪ በላይ እና ለረጅም ጊዜ ይከናወናሉ.በዚህ መንገድ, በአር ኤን ኤ መፍትሄ ውስጥ በጣም አነስተኛ መጠን ያለው RNase ካለ, በሚቀጥሉት ሙከራዎች ውስጥ ሚናቸውን ለመጫወት በጣም ተስማሚ አካባቢ እና ጊዜ ይኖራል, እና በእርግጥ ሙከራው በዚህ ጊዜ ቀዝቃዛ ይሆናል.ከዚህ በታች በአር ኤን ኤ መፍትሄ ውስጥ ቀሪ RNase መኖሩን የሚያረጋግጥ ዘዴ እናስተዋውቃለን።
3. የሙቀት ጥበቃ ሙከራ
በናሙናው ትኩረት መሰረት ሁለት 1000 ng አር ኤን ኤ ከአር ኤን ኤ መፍትሄ ይሳሉ እና ወደ 0.5 ሚሊር ሴንትሪፉጅ ቱቦ ይጨምሩ እና በ pH 7.0 Tris ቋት በጠቅላላ 10 ul መጠን ይጨምሩ እና ከዚያም የቧንቧውን ቆብ ይዝጉት.ከመካከላቸው አንዱን በቋሚ የሙቀት መጠን በ 70 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ባለው የውሃ መታጠቢያ ውስጥ ያስቀምጡ እና ለ 1 ሰአት ያሞቁ.ሌላኛው ክፍል በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ማቀዝቀዣ ውስጥ ለ 1 ሰዓት ተከማችቷል.ጊዜው ካለፈ በኋላ ሁለቱን ናሙናዎች ለኤሌክትሮፊዮሬሲስ ያስወግዱ.ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ከተጠናቀቀ በኋላ የሁለቱን ኤሌክትሮፊዮሬቲክ ባንዶች ያወዳድሩ.የሁለቱም ባንዶች ወጥነት ያላቸው ወይም ምንም ልዩ ልዩነት ከሌላቸው (በእርግጥ ባንዶቻቸውም በዘዴ 2 ውስጥ ያሉትን ሁኔታዎች ያሟላሉ) ይህ ማለት በአር ኤን ኤ መፍትሄ ውስጥ ምንም የተረፈ የ RNase ብክለት የለም ማለት ነው, እና የአር ኤን ኤ ጥራት በጣም ጥሩ ነው.በተቃራኒው, በ 70 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ የተቀመጠው ናሙና ግልጽ የሆነ መበላሸትን ካሳየ, በአር ኤን ኤ መፍትሄ ውስጥ የ RNase ብክለት መኖሩን ያመለክታል.
2 ለአር ኤን ኤ ለማውጣት የሙከራ ዘዴዎች እና ዘዴዎች
አር ኤን ኤን ስናወጣ ብዙ ጊዜ የሚያጋጥሙን ችግሮች፡ (1) የአር ኤን ኤ ምርት ዝቅተኛ ነው፤(2) አር ኤን ኤ ከባድ የጨው ብክለት አለው;(3) አር ኤን ኤ ከባድ የኦርጋኒክ መሟሟት ብክለት አለው;(4) የናሙና መበላሸት እና ሌሎች ችግሮች
1. በብዛት ጥቅም ላይ የዋሉ አጠቃላይ የአር ኤን ኤ ኤክስትራክሽን ሪጀንቶች
አጠቃላይ አር ኤን ኤ ከእንስሳት ቲሹዎች እና ከእንስሳት ህዋሶች ለማውጣት በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት የጓኒዲን ኢሶቲኦሲያኔት ዘዴ እና የትሪዞል ዘዴ ናቸው።በተለይም እንደ ጥንቸል ቆዳ እና ከእንስሳት ተያያዥ ቲሹዎች አጠቃላይ አር ኤን ኤ ማውጣትን የመሳሰሉ በተለይም ለማውጣት አስቸጋሪ ለሆኑ ትናንሽ ናሙናዎች እና ቲሹዎች ተስማሚ ነው;በተጨማሪም ፣ ትሪዞል ፣ እንደ አጠቃላይ ዓላማ የሊሲስ ሪአጀንት ፣ እንዲሁም የእፅዋት ሕብረ ሕዋሳትን ፣ ባክቴሪያዎችን ፣ ፈንገሶችን እና ሌሎች ሕብረ ሕዋሳትን ለማውጣት ሊያገለግል ይችላል።እንደ ካሜሊያ ኦሊፌራ፣ የሻይ ቅጠል፣ የአስገድዶ መድፈር ዘር፣ ወዘተ የመሳሰሉ ፖሊሶካካርዳይድ እና ፖሊፊኖልስ ላሉት የእጽዋት ቲሹዎች የ CTAB ዘዴ አጠቃላይ አር ኤን ለማውጣትም ይጠቅማል።
እንደ ተለመደው ዘዴ፣ ባለ ሁለት-አምድ ዘዴ በተለመደው የሙቀት አሠራሩ ምክንያት በጣም ታዋቂ ነው ፣ RNase መጨመር አያስፈልግም ፣ እና ደህንነት - ምንም ክሎሮፎርም ፣ ፌኖል እና ሌሎች ኦርጋኒክ ሪጀንቶች ለመውጣት።(የሚመከሩ ምርቶች )
2. አጠቃላይ አር ኤን ኤ ከእንስሳት ቲሹዎች ማውጣት
(1) ትኩስ ቲሹን ለመምረጥ ይሞክሩ ፣ ትኩስ ካልሆነ (በተለይ በሶስት ወር ጊዜ ውስጥ - 80 ℃ ማቀዝቀዣ ወይም በፈሳሽ ናይትሮጅን ውስጥ የቀዘቀዘ) ቲሹን በሚቆርጡበት ጊዜ በቀጥታ በክፍሉ የሙቀት መጠን አይቆርጡ ፣ በበረዶ ሳጥኑ ላይ ያድርጉት ፣ ተደጋጋሚ ቅዝቃዜን እና መቅለጥን ለማስወገድ ይሞክሩ።
(2) ንፁህ መቀሶችን እና ቲሹዎችን በመጠቀም ትንሽ ቲሹን ለመቁረጥ ፣ ናሙናውን በሚቆርጡበት ጊዜ የሕብረ ሕዋሱን ማዕከላዊ ክፍል ለመቁረጥ ይሞክሩ ፣ ወይም በመጀመሪያ ትልቁን ቲሹ ከመሃል ይቁረጡ እና ከዚያም ናሙናውን በአዲስ የተቆረጠ ቦታ ይቁረጡ ።የተወገደው ቲሹ ሙሉ በሙሉ መቆረጥ አለበት, የተቆረጠውን ቲሹ ያለ RNase ወደ EP ቱቦ ውስጥ ያስቀምጡ, ሊዛይድ ይጨምሩ, የተቆራረጡ ቲሹዎች ሙሉ በሙሉ በሊዛው ውስጥ መጋለጥ አለባቸው እና ለሆሞጂኒዜሽን ይዘጋጁ.
(3) ለወትሮው ቲሹዎች፣ ሙንግ ባቄላ መጠን ያላቸውን ቲሹዎች (30-60 ሚ.ግ.) ግብረ-ሰዶማዊነትን ይምረጡ።ቲሹዎቹ ከፍተኛ መጠን ያለው ፕሮቲን፣ ስብ ወይም ጥቅጥቅ ያሉ እንደ ጉበት ያሉ ፋይበርስ ቲሹዎች ካሏቸው የተቆረጡ ቲሹዎች መጠን በትክክል ይጨምራሉ ወይም ይቀንሱ (አማራጭ) 10 ~ 20 ሚ.ግ.
(4) የዓሳ ጡንቻ፣ ሽሪምፕ ሥጋ፣ ጄሊፊሽ እና ሌሎች ከፍተኛ የውሃ ይዘት ያላቸው ቲሹዎች ከወጡ፣ የናሙና መጠኑ በትክክል መጨመር አለበት (የሚመከር 100-200 mg)።
(5) ሁኔታዎች ከተፈቀዱ የእንስሳት ህብረ ህዋሳት እንደዚህ አይነት መሳሪያዎች ከሌሉ በከፍተኛ ደረጃ ቲሹ ግብረ-ሰዶማዊነት ከተሰራ በኋላ በቀጥታ ሊወጣ ይችላል.
(6) ከመጨረሻው ማውጣት በኋላ የተገኘው አር ኤን ኤ የአር ኤን ኤ መበላሸትን ለመቀነስ ወዲያውኑ በበረዶ ሳጥኑ ላይ መቀመጥ አለበት.
3. የእንስሳት ሕዋስ አር ኤን ኤ ማውጣት
(1) ተንጠልጣይ ህዋሶች፡ በቀጥታ ሴንትሪፉፍ ያድርጉ እና መካከለኛውን ያስወግዱ፣ በማይጸዳው PBS ለ1-2 ጊዜ ይታጠቡ፣ ከዚያም በተገቢው የፒቢኤስ መጠን ይንጠለጠሉ እና ከዚያ lysate ለሊሲስ ይጨምሩ።ፈሳሹን ሙሉ በሙሉ ካስወገዱ በኋላ ሊስቱን በቀጥታ ወደ ተዘጉ ህዋሶች አይጨምሩ.ይህ በውጫዊው ሽፋን ላይ ያሉት የሊዝድ ሴሎች ከውጨኛው ሽፋን በኋላ የሚለቀቁት የሂስቶን እሽግ ከሴሎች ውጫዊ ክፍል ጋር እንዲጣበቁ ያደርጋል, በዚህም በፔሌት ውስጥ ያሉ ሴሎች ከሊዛት ጋር ያለውን ግንኙነት ይገድባል., ያልተሟላ የሕዋስ ሊሲስ እና የአር ኤን ኤ ምርትን ይቀንሳል.
(2) ከፊል-ተከታታይ የሆኑ ወይም በደንብ የማይጣበቁ ሴሎች፡- መካከለኛውን ካስወገዱ በኋላ ለ 1-2 ጊዜ በፒቢኤስ ይታጠቡ ከዚያም ተገቢውን መጠን ያለው ፒቢኤስ ይውሰዱ እና የባህል ዲሽውን በ pipette ወይም ሽጉጥ ንፉ ሴሎቹን ለማጥፋት እና ከአር ኤን ኤ ነፃ ወደሆኑ ሴሎች ያስተላልፉ።ለማንሳት ወደ ኢንዛይም የ EP ቱቦ ውስጥ ያለውን ሊዛን ይጨምሩ.
(3) ተጣባቂ ሴሎች፡ በቅድሚያ በትሪፕሲን መፈጨት አለባቸው፣ ከዚያም ወደ አርናሴ-ነጻ EP ቱቦዎች መሰብሰብ፣ ሴንትሪፉፍ (ሴንትሪፉድ) ተዘጋጅተው ከመጠን በላይ የሆነ ትራይፕሲንን ለማስወገድ 1-2 ጊዜ በፒቢኤስ ይታጠቡ እና በተገቢው የፒቢኤስ መጠን እንደገና ይድገሙ ከዚያም ወደ ማስወገጃው ደረጃ ይቀጥሉ።
4. የእፅዋት አር ኤን ኤ ማውጣት
የእፅዋት ቲሹዎች በ phenolic ውህዶች የበለፀጉ ናቸው ፣ ወይም በፖሊስካካርዴድ የበለፀጉ ናቸው ፣ ወይም አንዳንድ ያልታወቁ ሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይቶች ይዘዋል ፣ ወይም ከፍተኛ የ RNase እንቅስቃሴ አላቸው።እነዚህ ንጥረ ነገሮች ከሴል ሴልሲስ በኋላ ከአር ኤን ኤ ጋር ተጣምረው የማይሟሟ ውስብስብ ወይም ኮሎይድል ዝቃጮችን ይፈጥራሉ, ይህም ለማስወገድ አስቸጋሪ ነው.ስለዚህ, የእጽዋት ቲሹን ስናወጣ, ለእጽዋት የሚሆን ኪት መምረጥ አለብን.በመሳሪያው ውስጥ ያለው lysate የ polyphenols ቀላል ኦክሳይድ እና የ polysaccharide ውህዶች እና ኑክሊክ አሲዶች የመለየት ችግሮችን ውጤታማ በሆነ መንገድ መፍታት ይችላል።
(ለፖሊስካካርዳይድ ፖሊፊኖል ተክል አር ኤን ኤ ለማውጣት፣ የሚመከሩ ምርቶች፡-
(፩) የተክሉ ልጣጭ፣ ልጣጭ፣ ዘር፣ ቅጠል፣ ወዘተ... በሙቀጫ ውስጥ ሙሉ በሙሉ መፍጨት አለበት።በመፍጨት ሂደት ውስጥ ናሙናውን ማቅለጥ ለማስወገድ ፈሳሽ ናይትሮጅን በጊዜ መሙላት አለበት.የአር ኤን ኤ መበላሸትን ለማስወገድ የመሬቱ ናሙና በፍጥነት ወደ ሊዛት መጨመር እና መንቀጥቀጥ አለበት.
(2) በፋይበር የበለጸጉ ናሙናዎች እንደ ሩዝና የስንዴ ቅጠሎች የማውጣቱ መጠን በትክክል መቀነስ አለበት፣ አለበለዚያ የቲሹ መፍጨት እና ሊሲስ ሙሉ በሙሉ ስለማይሆን የተወሰደው አር ኤን ኤ አነስተኛ ምርትን ያስከትላል።
(3) ከፍተኛ የውሃ ይዘት ላለው የእጽዋት ቲሹዎች እንደ የሮማን ፍራፍሬ ፣የሐብሐብ ፍሬ ፣የፒች ፍሬ ፣ወዘተ የናሙና መጠኑ በትክክል መጨመር አለበት (100-200 ሚ.ግ አማራጭ ነው)።
(4) እንደ ዕፅዋት ቅጠሎች፣ ራይዞሞች፣ ጠንካራ ፍራፍሬዎች እና ሌሎች ቁሳቁሶች ያሉ የእፅዋት ቲሹዎች በአጠቃላይ ፈሳሽ ናይትሮጅን በመጠቀም በሙቀጫ ውስጥ ያሉትን ንጥረ ነገሮች በደንብ እንዲሞቁ ይመከራሉ እና ከዚያም ወደ ማስወገጃው ደረጃ ይቀጥሉ።የተለመዱ ቲሹ homogenizers የእጽዋት ቲሹዎች ተመሳሳይነት ላይ ውጤታማ ላይሆን ይችላል, እና በአጠቃላይ አይመከርም.
5. ለአር ኤን ኤ ማውጣት ቅድመ ጥንቃቄዎች
(1) የቲሹ ናሙናዎች በተደጋጋሚ እንዳይቀዘቅዝ እና እንዳይቀልጡ በተቻለ መጠን ትኩስ መሆን አለባቸው።
(2) ቲሹ በሚወጣበት ጊዜ ሙሉ በሙሉ መፍጨት አለበት, እና የቲሹ መጠን በጣም ትንሽ መሆን የለበትም, ከመጠን በላይ መብዛት ብቻ ነው.
(3) ናሙናውን ሙሉ በሙሉ ለመቦርቦር ሊስቱን ከጨመረ በኋላ በቂ የመታቀፊያ ጊዜ መሰጠት አለበት.
(4) የTrizol ዘዴን ለማንሳት በሚጠቀሙበት ጊዜ ከስትራቲፊሽን በኋላ የሱፐርናታንትን የመምጠጥ መርህ "ከመተንፈስ ያነሰ ወደ ውስጥ መተንፈስ ይመረጣል" እና ወደ መካከለኛው ንብርብር መውጣት የለበትም, አለበለዚያ ከባድ የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ብክለትን ያስከትላል.
(5) በሚታጠብበት ጊዜ የመታጠቢያ ፈሳሹ በደንብ መታጠብን ለማረጋገጥ በቧንቧ ግድግዳው ዙሪያ ሙሉ በሙሉ ዘልቆ መግባት አለበት.
(6) ለአምዱ የማስወጫ ዘዴ ከታጠበ በኋላ ዓምዱን ከመለየት በተጨማሪ የማስታወቂያ አምድ እጅግ በጣም ንጹህ በሆነ አግዳሚ ወንበር ላይ መቀመጥ እና ለ 5-10 ደቂቃዎች መተንፈስ ያለበት ኦርጋኒክ ሟሟን ወደ ደረቅነት ሙሉ በሙሉ እንዲተን ማድረግ አለበት።
(7) በመጨረሻው የዓምድ ዘዴ, የ DEPC ውሃ ከጨመረ በኋላ, ለ 3-5 ደቂቃዎች መጨመር አለበት, ወይም የ DEPC ውሃ ወደ 60 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በቅድሚያ በማሞቅ የኤሌክትሮል ምርትን ለመጨመር.በባህላዊው Trizol cleavage እና isopropanol የዝናብ ዘዴ የመጨረሻው አር ኤን ኤ በ DEPC ውሃ ውስጥ ይሟሟል, ስለዚህ ለመሟሟት ተስማሚ ጊዜ መሰጠት አለበት, እና የሴንትሪፉጅ ቱቦ የታችኛው ክፍል በ pipette ጫፍ ያለማቋረጥ መተንፈስ አለበት.
3 ቲhree ለዝቅተኛ የአር ኤን ኤ ትኩረት/ደካማ ጥራት መንስኤዎች እና መፍትሄዎች
1. ምርቱ በጣም ዝቅተኛ ነው
የተወሰደው ናሙና በጣም ዝቅተኛ ነው, አጠቃላይ መጠኑ በቂ አይደለም, ወይም የተወሰደው ናሙና በጣም ብዙ እና ሊሲስ አልተጠናቀቀም;ተገቢውን ጥራት ያለው ቲሹ ወይም ሴሎች ለማውጣት ጥቅም ላይ መዋል አለባቸው, የናሙናው ቅድመ-ህክምና በደንብ መደረግ አለበት, እና ሊስሲስ በቂ መሆን አለበት.
2. የጂኖም ቀሪዎች
በTrizol ዘዴ በሚወጣበት ጊዜ, ከመጠን በላይ ፈሳሽ ከተሸፈነ በኋላ ወደ መካከለኛው ንብርብር ሲጠባ, ከባድ የጂኖም ብክለት ይከሰታል;ወደ መካከለኛው ሽፋን እንዳይጠቡ በሚደረደሩበት ጊዜ የበለጠ ጥንቃቄ መደረግ አለበት.የዓምድ ዘዴው ለማውጣት ጥቅም ላይ የሚውል ከሆነ ዲናሴ I የያዘ ኪት ለማውጣት ሊመረጥ ይችላል።በገለባው ላይ የተጣበቀው ኑክሊክ አሲድ በቀጥታ ከዲ ኤን ኤ ኤስ ጋር ይዋሃዳል ፣ይህም የዲኤንኤ ቅሪቶችን በእጅጉ ይቀንሳል።
3. አር ኤን ኤ መበላሸት
የተወሰደው ናሙና እራሱ መበላሸቱ ወይም በማውጣቱ ሂደት ውስጥ የተከሰተው መበላሸት ሊሆን ይችላል;በተቻለ መጠን ትኩስ ናሙናዎች ለአር ኤን ኤ ለማውጣት ጥቅም ላይ መዋል አለባቸው, እና የተሰበሰቡ ናሙናዎች በፈሳሽ ናይትሮጅን ወይም -80 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ማቀዝቀዣ ውስጥ በጊዜ ውስጥ መቀመጥ አለባቸው, እና ተደጋጋሚ ቅዝቃዜ እና ማቅለጥ መወገድ አለባቸው.አርኤንኤሴ/ዲኤንኤዝ ነፃ ምክሮች፣ ሴንትሪፉጅ ቱቦዎች እና ሌሎች ቁሳቁሶች በአር ኤን ኤ ማውጣት ሂደት ውስጥ ጥቅም ላይ መዋል አለባቸው።የማውጣቱ ሂደት በተቻለ ፍጥነት መሆን አለበት.የሚወጣው አር ኤን ኤ በበረዶ ሳጥን ላይ መቀመጥ እና በ -80 በጊዜ ውስጥ መቀመጥ አለበት.የወጣውን አር ኤን ኤ በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ መለየት ካስፈለገ ኤሌክትሮፊዮረሲስ ከተመረቀ በኋላ ወዲያውኑ መደረግ አለበት እና የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ቋት በአዲስ በተዘጋጀ መተካት አለበት።
4. የጨው እና የኦርጋኒክ መሟሟት ቅሪቶች
የማውጣት ሬጀንቶች የ phenol እና guanidine ጨዎችን ይይዛሉ, እና የእቃ ማጠቢያው ኤታኖል ይዟል.በማውጣት ሂደት ውስጥ ሊዛን ሙሉ በሙሉ አልተዋጠም እና አልተጣለም, እና ማጠቢያው መፍትሄ ሙሉ በሙሉ አልደረቀም.ቀሪዎቹ ጨዎች እና ኦርጋኒክ መሟሟቶች ለቀጣይ የተገላቢጦሽ ግልባጭ እና PCR ጎጂ ናቸው።የተለያዩ የመከልከል ደረጃዎች, ስለዚህ በማውጣት ሂደት ውስጥ የቲሹ lysate ሙሉ በሙሉ መወገድ አለበት, እና እጥበት በቂ መሆን አለበት ስለዚህም በዙሪያው ያለው የቧንቧ ግድግዳዎች መታጠብ ይቻላል.በተጨማሪም ቱቦው ባዶ እና መተንፈስ አስፈላጊ እርምጃ ነው, ይህም የኦርጋኒክ ቁስ አካልን የበለጠ ይቀንሳል.
ስለ አር ኤን ኤ ማውጣት የበለጠ መረጃ ለማግኘት እባክዎን የእኛን ድረ-ገጽ ይከተሉ፡-
ለበለጠ መረጃ www.foreivd.com
የልጥፍ ሰዓት፡- ዲሴ-01-2022
