Buccal Swab/ኤፍቲኤ ካርድ ዲኤንኤ ማግለል ኪት ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ማውጣት ወይም ማጥራት ከቡካል ስዋብስ
የኪት መግለጫ፡-
ከፍተኛ ጥራት ያለው ጂኖሚክ ዲኤንኤ ከ buccal swab/FTA ካርድ ናሙናዎች በፍጥነት ያፅዱ።
◮ምንም የ RNase ብክለት የለም፡በመሳሪያው የቀረበው ዲ ኤን ኤ ብቻ አምድ በሙከራው ወቅት RNase ሳይጨምር አር ኤን ኤውን ከጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማውጣት ያስችላል፣ ይህም ላቦራቶሪ በውጫዊ አር ናስ እንዳይበከል ይከላከላል።
◮ፈጣን ፍጥነት;Foregene Protease ከተመሳሳይ ፕሮቲሊስቶች የበለጠ ከፍተኛ እንቅስቃሴ አለው, እና የቲሹ ናሙናዎችን በፍጥነት ያበላሻል;ክዋኔው ቀላል ነው, እና የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ የማውጣት ስራ በ20-80 ደቂቃዎች ውስጥ ሊጠናቀቅ ይችላል.
◮ምቹ፡ሴንትሪፉግሽን የሚከናወነው በክፍል ሙቀት ውስጥ ነው, እና በ 4 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ወይም የኤታኖል የዲ ኤን ኤ ዝናብ አያስፈልግም.
◮ደህንነት፡ኦርጋኒክ ሬጀንት ማውጣት አያስፈልግም።
◮ጥራት ያለው:የተገኘው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትላልቅ ቁርጥራጮች ያሉት ሲሆን አር ኤን ኤ የለም፣ አር ኤን ኤ የሌለው እና እጅግ በጣም ዝቅተኛ ion ይዘት ያለው ሲሆን ይህም የተለያዩ ሙከራዎችን መስፈርቶች ሊያሟላ ይችላል።
◮ማይክሮ-ኤሉሽን ሲስተም;የታችኛውን ተፋሰስ ለመለየት ወይም ለሙከራ ምቹ የሆነውን የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትኩረትን ሊጨምር ይችላል።
መግለጫ
ይህ ኪት ከፍተኛ ትኩረት ያለው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ከቡካል ስዋቦች እና ከኤፍቲኤ ካርድ (የደም ነጠብጣቦች) ለማግኘት ቀልጣፋ እና ፈጣን ዘዴን ይሰጣል።ኩባንያችንን በመጠቀም'ልዩ የዲ ኤን ኤ-ብቻ የሲሊካ ሽፋን እሽክርክሪት አምድ እና ፎርሙላ ከ Foregene Protease ጋር ተደምሮ ከፍተኛ ትኩረት ያለው ከፍተኛ ጥራት ያለው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ በ80 ደቂቃ ውስጥ ሊወጣ ይችላል።በልዩ ሁኔታ የተነደፈው ትንሽ የመንጻት ዓምድ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ያገናኛል፣ እና ዲ ኤን ኤው በትንሽ መጠን ሊወጣ ይችላል (15μl) የተገኘውን የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትኩረትን ለመጨመር የኤሌክትሮማግኔቲክ ሲስተም ለታች ለመለየት ወይም ለመሞከር ምቹ ነው።ኪቱ በአንድ ጊዜ አንድ ወይም ብዙ ናሙናዎችን ማካሄድ ይችላል፣ እና የማጥራት ሂደቱ እንደ ፌኖል፣ ክሎሮፎርም እና ጊዜ የሚወስድ አይሶፕሮፓኖል ወይም ኢታኖል የዝናብ የመሳሰሉ ኦርጋኒክ ንጥረ ነገሮችን ማውጣት አያስፈልገውም፣ እና አሰራሩ ቀላል እና ጊዜ ቆጣቢ ነው።
ዝርዝሮች
50 መሰናዶዎች
Kit ክፍሎች
| ቋት ST1 |
| ቋት ST2 |
| ሊኒያር አሲሪላሚድ |
| ቋት PW |
| ቋት WB |
| ቋት ኢ.ቢ |
| Foregene Protease |
| ዲ ኤን ኤ-ብቻ አምድ |
| መመሪያዎች |
ባህሪዎች እና ጥቅሞች
- ምንም የ RNase ብክለት የለም፡ በመሳሪያው የቀረበው ዲ ኤን ኤ ብቻ አምድ በሙከራው ወቅት RNase ን ሳይጨምር አር ኤን ኤ ኤን ኤን ለማስወገድ ያስችላል።
ፈጣን ፍጥነት፡ Foregene Protease ከተመሳሳይ ፕሮቲን ከፍ ያለ እንቅስቃሴ አለው፣ ናሙናዎችን በፍጥነት ያፈጫል።ቀላል ቀዶ ጥገና.
- ምቹ፡ ሴንትሪፉግቴሽን የሚካሄደው በክፍል ሙቀት ነው፣ እና 4°C ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ያለው ሴንትሪፍጋሽን ወይም የኤታኖል የዲኤንኤ ዝናብ አያስፈልግም።
-ደህንነት፡- ምንም ኦርጋኒክ ሬጀንት ማውጣት አያስፈልግም።
-ከፍተኛ ጥራት፡-የተወጣው ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትላልቅ ቁርጥራጮች፣አር ኤንኤ የለም፣አርኤንኤስ የለም፣እና እጅግ በጣም ዝቅተኛ ion ይዘት ያለው ሲሆን ይህም የተለያዩ ሙከራዎችን መስፈርቶች ሊያሟላ ይችላል።
-ማይክሮ ኢሉሽን ሲስተም፡- የታችኛውን ተፋሰስ ለመለየት ወይም ለሙከራ ምቹ የሆነውን የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ትኩረትን ሊጨምር ይችላል።
Kit መተግበሪያ
ከሚከተሉት ናሙናዎች የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማጽዳት ተስማሚ ነው-buccal swabs, ኤፍቲኤ ካርድ (የደም ነጠብጣቦች).
የማከማቻ እና የመደርደሪያ ሕይወት
- ይህ ኪት ለ 12 ወራት በደረቅ ሁኔታዎች ውስጥ በክፍል ሙቀት (15-25 ° ሴ) ውስጥ ሊከማች ይችላል;ረዘም ላለ ጊዜ ማከማቸት ካስፈለገ ከ2-8 ° ሴ ሊከማች ይችላል.
ማሳሰቢያ: በዝቅተኛ የሙቀት መጠን ከተከማቸ, መፍትሄው ለዝናብ የተጋለጠ ነው.ከመጠቀምዎ በፊት መፍትሄውን ለተወሰነ ጊዜ በቤት ውስጥ ሙቀት ውስጥ ማስቀመጥዎን ያረጋግጡ.አስፈላጊ ከሆነ በ 37 ዲግሪ ሴንቲግሬድ የውሀ መታጠቢያ ገንዳ ውስጥ ለ 10 ደቂቃዎች ቀድመው ይሞቁ እና ከመጠቀምዎ በፊት ይቀልጡት.
-Foregene Protease መፍትሄ ለረጅም ጊዜ (3 ወራት) በክፍል ሙቀት ውስጥ ሲከማች የሚሠራ ልዩ ቀመር አለው;እንቅስቃሴው እና መረጋጋት በ 4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ሲከማች የተሻለ ይሆናል, ስለዚህ በ 4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ እንዲከማች ይመከራል, በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ እንዳይቀመጥ ያስታውሱ.
የመንጻቱ አምድ ተዘግቷል።
በዚህ ኪት ውስጥ ፣ በጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ማውጣት ኦፕሬሽን ውስጥ ፣ የመንፃት አምድ በቀጥታ በናሙና ኢንዛይማቲክ ሊሲስ ድብልቅ ላይ ያለ ሴንትሪፍግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግላል ምንም ያልተሟላ ኢንዛይም እና የናሙና ከፍተኛ viscosity ነው።
የሚከተሉት ሊሆኑ የሚችሉ ምክንያቶች የሚከተሉት ናቸው.
1. የሕብረ ሕዋሳትን ናሙናዎች ያልተሟላ የኢንዛይም መፈጨት.
የውሳኔ ሃሳብ፡ የ Foregene Protease ናሙና የማቀነባበሪያ ጊዜ በአግባቡ ሊራዘም ይችላል ወይም ከመጠን በላይ መጠኑ በ 12,000 rpm (~ 13,400 × g) ለ 5 ደቂቃዎች ከተሰራ በኋላ መውሰድ ይቻላል.
2. የቲሹ ናሙናዎችን ወይም ትላልቅ ቲሹዎችን ከመጠን በላይ መጠቀም.
ምክር: በናሙናው ውስጥ ከ 1 Buccal swab መብለጥ የለበትም;ናሙናው በጣም ትልቅ ከሆነ፣ በዚሁ መሰረት የ Buffer ST1፣ Foregene Protease፣ Buffer ST2 መጠን ይጨምሩ።
3. የናሙና viscosity በጣም ከፍተኛ ነው.
ምክር፡ ናሙናዎች ከጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ከመውጣቱ በፊት በ10 ሚሜ ትሪስ-ኤች.ኤል.ኤል በትክክል ሊሟሟላቸው ይችላሉ።
4. የደም ካርዱ ቁርጥራጮች ጠጥተዋል.
የውሳኔ ሃሳብ፡ ደረጃ 6 የደም ቦታ (ኤፍቲኤ ካርድ) ጂኖሚክ የማውጣት ጊዜያዊ ሴንትሪፍግሽን ጊዜ በአግባቡ ሊራዘም ይችላል።
ዝቅተኛ ምርት ወይም ዲ ኤን ኤ የለም
የናሙና መነሻ፣ የናሙና ማከማቻ ሁኔታዎች፣ የናሙና ዝግጅት፣ ማጭበርበር፣ ወዘተ ጨምሮ የተለያዩ የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ምርትን የሚነኩ የተለያዩ ምክንያቶች አሉ።
ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ በሚወጣበት ጊዜ ሊገኝ አይችልም
ሊሆኑ የሚችሉ ምክንያቶች የሚከተሉት ናቸው.
1. ናሙናዎችን ወይም ማከማቻዎችን ለረጅም ጊዜ ያለአግባብ ማቆየት ወደ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ መበላሸት ያስከትላል።
የውሳኔ ሃሳብ፡- የአፍ ውስጥ መጠበቂያዎች አዲስ ናሙና ቢወሰዱ ይመረጣል፣ እና ለጂኖሚክ ዲኤንኤ ማውጣት ስራዎች የተጠበቁ ስዋቦችን መጠቀም ጥሩ አይሆንም።የደም ስፖት ናሙናዎች ጥራቱ ብቁ መሆኑን እና የማከማቻ ጊዜ በጣም ረጅም መሆን እንደሌለበት ማረጋገጥ አለባቸው.
2. በጣም ትንሽ የቲሹ አጠቃቀም ከጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ላይ ምንም ውጤት ሊያስከትል አይችልም.
የውሳኔ ሃሳብ፡ በኦፕሬሽን መመሪያው ውስጥ ያሉትን የቡካ ስዋብ ናሙና መመሪያዎችን ተከተሉ እና በተቻለ መጠን ብዙ ጊዜ ያብሱ እና በቂ ህዋሶች ከአፍ ህዋሱ ጋር ለጂኖሚክ ዲኤንኤ ማውጣት፤ለደም ቦታ ናሙና ማውጣት, የደም ቦታ መቁረጫ ቦታ በትክክል መጨመር ይቻላል.
3. Foregene Protease አግባብ ባልሆነ መንገድ ተጠብቆ ይቆያል, በዚህም ምክንያት የእንቅስቃሴው መቀነስ ወይም አለመንቀሳቀስ.
ምክር፡ የ Foregene Protease ማከማቻ ሁኔታዎችን ያረጋግጡ ወይም ለኤንዛይም ምላሽ በአዲስ Foregene Protease ይተኩ።
4. የመሳሪያውን ወይም የማከማቻ ጊዜን በአግባቡ አለመጠበቅ በጣም ረጅም ነው, በዚህም ምክንያት በመሳሪያው ውስጥ ያሉ አንዳንድ ክፍሎች አለመሳካት.
ምክር፡ ለተዛማጅ ሂደቶች አዲስ የ Buccal swab ዲኤንኤ ማግለያ ኪት ይግዙ።
5. Buffer WB ፍፁም ኢታኖልን አይጨምርም።
ምክር፡ ቋት WB ትክክለኛውን የፍፁም ኢታኖል መጠን እንደሚጨምር ያረጋግጡ።
6. ኤሊየኑ በሲሊኮን ፊልም ላይ በትክክል አልተጨመረም.
የውሳኔ ሃሳብ፡- 65 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ቀድመው የሚሞቁ የኤሉየንት ጠብታዎችን ወደ የሲሊኮን ሽፋን መሃል ይጨምሩ እና ለ 5 ደቂቃዎች በቤት ሙቀት ውስጥ የኤሌሽን ውጤታማነትን ይጨምሩ።
ዝቅተኛ ምርት ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ተለይቷል።
የሚከተሉት ሊሆኑ የሚችሉ ምክንያቶች የሚከተሉት ናቸው.
1. ናሙናዎችን ወይም ማከማቻዎችን ለረጅም ጊዜ ያለአግባብ ማቆየት ወደ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ መበላሸት ያስከትላል።
የውሳኔ ሃሳብ፡ የአፍ ውስጥ መጠበቂያዎች አዲስ ናሙና ቢወሰዱ ይመረጣል፣ እና የተጠበቁ ስዋቦች ለጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማውጣት ጥቅም ላይ መዋል የለባቸውም።
2. የቲሹ ናሙና መጠን በጣም ትንሽ ከሆነ, የሚወጣው የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ይዘት ያነሰ ይሆናል.
የውሳኔ ሃሳብ፡ በኦፕሬሽን መመሪያው ውስጥ ያለውን የአፍ ውስጥ የናሙና ናሙና መመሪያዎችን ተከተሉ፣ በተቻለ መጠን ብዙ ጊዜ በማጽዳት በቂ ህዋሶች ከአፍ ህዋሱ ጋር ለጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ለማውጣት።
3. Foregene Protease አግባብ ባልሆነ መንገድ ተጠብቆ ይቆያል, በዚህም ምክንያት የእንቅስቃሴው መቀነስ ወይም አለመንቀሳቀስ.
ምክር፡ የ Foregene Protease ማከማቻ ሁኔታዎችን ያረጋግጡ ወይም ለኤንዛይም ምላሽ በአዲስ Foregene Protease ይተኩ።
4. የተንቆጠቆጡ ችግሮች.
ምክር፡ ለማብራራት Buffer EB ይጠቀሙ;ddH የሚጠቀሙ ከሆነ2ኦ ወይም ሌሎች ኤለመንቶች፣ የኢሉቴቱ ፒኤች ከ7.0-8.5 መካከል መሆኑን ያረጋግጡ።
5. ኤሉቴቱ በትክክል በ dropwise አልተጨመረም.
የውሳኔ ሃሳብ፡- የኤሌክትሮማግኔቲክ ጠብታዎችን በሲሊኮን ሽፋን መሃል ላይ ይጨምሩ እና ለ 5 ደቂቃዎች በቤት ሙቀት ውስጥ የኤሌሽን ውጤታማነትን ይጨምሩ።
6. የኤሌክትሮል ፈሳሽ በጣም ትንሽ ይከማቻል.
ምክር፡ በመመሪያው ውስጥ እንደ አስፈላጊነቱ ለጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ eluent ይጠቀሙ፣ ቢያንስ ከ15 μl ያላነሰ።
የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ተለይቶ ዝቅተኛ ንፅህና
ዝቅተኛ የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ንፅህና ወደ ውድቀት ወይም አጥጋቢ ያልሆነ ውጤት ሊያስከትል ይችላል የታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች ለምሳሌ፡ ኢንዛይሞች ሊቆረጡ አይችሉም፣ PCR የፍላጎት ጂን ስብርባሪን ማግኘት አይችልም፣ ወዘተ.
ሊሆኑ የሚችሉ ምክንያቶች የሚከተሉት ናቸው.
1. የሄትሮፕሮቲን ብክለት, አር ኤን ኤ ብክለት.
ትንተና: የመንጻት አምድ Buffer PW በመጠቀም አልታጠብም ነበር;የ Buffer PW ማጠቢያ ማጽጃ አምድ ትክክለኛውን ሴንትሪፉጋል ፍጥነት በመጠቀም አልታጠበም።
ምክር: ኤታኖልን ከመጨመራቸው በፊት በሱፐርናንት ውስጥ ምንም ዝናብ አለመኖሩን ያረጋግጡ;በመመሪያው መሠረት የመንጻቱን ዓምድ ማጠብዎን ያረጋግጡ ፣ እና ይህ ደረጃ መተው አይቻልም።
2. የንጽሕና ion ብክለት.
ትንታኔ፡ Buffer WB ማጠቢያ ማጽጃ አምድ አንድ ጊዜ ብቻ ተትቷል ወይም ታጥቧል፣ ይህም ቀሪ ionክ መበከልን አስከተለ።
ምክር፡ በተቻለ መጠን ቀሪ ionዎችን ለማስወገድ Buffer WBን 2 ጊዜ ማጠብዎን ያረጋግጡ።
3. አር ኤን ኤ ኢንዛይም መበከል.
ትንታኔ: የውጭ RNases ወደ ቋት ተጨምሯል;Buffer PW የማጠብ ስራ ትክክል አልነበረም፣ይህም የ RNase ተረፈዎችን አስከትሏል፣የታችኛው ተፋሰስ አር ኤን ኤ የሙከራ ስራዎችን ይነካል፣ ለምሳሌ በብልቃጥ ግልባጭ።
ምክር፡ Foregene ተከታታይ ኑክሊክ አሲድ ማግለል ኪት ያለ ተጨማሪ RNase መጨመር አር ኤን ኤ ሊያስወግድ ይችላል፣በመሆኑም buccal Swab/FTA Card DNA Isolation Kit RNase መጨመር የለበትም።ለ Buffer PW ማጠቢያ ማጽጃ ዓምድ መመሪያዎችን መከተልዎን ያረጋግጡ፣ እና ይህ ደረጃ ሊታለፍ አይችልም።
4. የኢታኖል ቅሪት.
ትንተና፡ Buffer WB የመንፃት አምድ ከታጠበ በኋላ ባዶ ቱቦ ሴንትሪፍግሽን አላደረገም።
የውሳኔ ሃሳብ፡ በመመሪያው መሰረት ትክክለኛውን ባዶ ቱቦ ሴንትሪፍግሽን ስራ ያከናውኑ።
5. ሌሎች የንጽሕና ብክለት.
ትንታኔ: የተቀመጡ ናሙናዎች ወይም ልዩ ናሙናዎች አስቀድመው አልተዘጋጁም.
ምክር፡ እንደ መመሪያው ናሙናውን በደንብ ያዙት።
