የ mRNA ክትባት ምንድነው?
የኤምአርኤን ክትባት አር ኤን ኤ ወደ ሰውነት ሴሎች በማስተላለፊያው ፕሮቲን አንቲጂኖችን ለመግለፅ እና ለማምረት በብልቃጥ ውስጥ ከተደረጉ ማሻሻያዎች በኋላ ሰውነት አንቲጂንን የመከላከል አቅምን እንዲያሳድግ ያደርጋል።[1፣3].
ምስል 1፡ የ mRNA ክትባት ቀጥተኛ መርፌ ውጤት የመርሃግብር ንድፍ [2]
የ mRNA ክትባቶች ምደባ
የ mRNA ክትባቶች በሁለት ይከፈላሉ፡-የማይባዛmRNA እናራስን ማጉላትmRNA: ራስን ማጉላት ኤምአርኤን የዒላማውን አንቲጂን ኮድ ከማስቀመጥ በተጨማሪ በሴሉላር አር ኤን ኤ ማጉላት እና የፕሮቲን አገላለጽ ዘዴን ማባዛት ያስችላል።የማይባዙ የኤምአርኤን ክትባቶች ዒላማ አንቲጂኖችን ብቻ ያመልኩ እና 5'እና 3'ያልተተረጎሙ ክልሎች (UTR) ይይዛሉ።አጠቃላይ የመላመድ ማነቃቂያ እና ተፈጥሯዊ የበሽታ መከላከያዎችን ማለትም በሳይቱ አንቲጂን አገላለጽ እና የአደጋ ምልክት ስርጭትን ይሰጣሉ እና የሚከተሉትን አፕሊኬሽኖች አሏቸው ።[2፣3]
● አጠቃላይ የመላመድ ችሎታን እና ተፈጥሯዊ የበሽታ መከላከያዎችን ማለትም በሳይቱ አንቲጂን አገላለጽ እና የአደጋ ምልክት ስርጭትን መስጠት ይችላል።
●አስቂኝ እና ሴሉላር ተጽእኖ ፈጣሪዎችን እና የበሽታ መከላከያ ትውስታን ጨምሮ "ሚዛናዊ" የበሽታ መከላከያ ምላሽን ሊያመጣ ይችላል
●የክትባት አሰራርን ውስብስብነት ሳይጨምር የተለያዩ አንቲጂኖችን ማጣመር ይችላል።
●የመከላከያ አቅም ቀጣይነት ያለው መሻሻል በተደጋጋሚ በክትባት ሊገኝ ይችላል፣ እና ለአጓጓዡ ምንም ወይም ትንሽ የበሽታ መከላከያ ምላሽ የለም
●ሙቀት የተረጋጋ የኤምአርኤንኤ ክትባቶች የክትባቶችን መጓጓዣ እና ማከማቻን ቀላል ያደርገዋል
ምስል 2፡ የኤምአርኤንኤ ክትባት እና አንቲጂን አገላለጽ ዘዴው ስዕላዊ መግለጫ [4]
የ mRNA ክትባቶች ባህሪያት
ከተለምዷዊ ክትባቶች ጋር ሲነጻጸር, mRNA ክትባቶች ቀላል የምርት ሂደቶች, ፈጣን የእድገት ፍጥነቶች, የሕዋስ ባህል አያስፈልጋቸውም እና አነስተኛ ዋጋ አላቸው.ከዲኤንኤ ክትባቶች ጋር ሲነጻጸር, የ mRNA ክትባቶች ወደ ኒውክሊየስ ውስጥ መግባት አያስፈልጋቸውም እና ወደ አስተናጋጅ ጂኖም የመቀላቀል አደጋ አይኖርም.የግማሽ ህይወት በማሻሻያ ሊስተካከል ይችላል.
ሠንጠረዥ 1: የ mRNA ክትባቶች ጥቅሞች እና ጉዳቶች
|
| ጥቅም | ጉድለት |
| mRNA ክትባት | ፈጣን ምርምር እና ልማት, የክትባት ምርት 40 ቀናት ብቻ ይወስዳል | አላስፈላጊ የመከላከያ ምላሽን ያነሳሱ
|
| በፊዚዮሎጂ ሁኔታዎች ውስጥ mRNA አለመረጋጋት, በቀላሉ ለማዋረድ ቀላል | ሊሆኑ የሚችሉ የሕክምና ሚውቴሽን ለማስቀረት ወደ ጂኖም አይዋሃድም።
| |
| ምንም የኑክሌር የትርጉም ምልክት አያስፈልግም, ግልባጭ | የደህንነት ኑክሌር ውጤታማነት ለማረጋገጥ ይቀራል
|
ምስል 3፡ የ mRNA ክትባት ምርት እና ዝግጅት ፍሰት ገበታ [4]
Foregene የቫይረስ አር ኤን ኤ ማግለል ስብስብ
RT-qPCR ቀላል (አንድ እርምጃ)
የ mRNA ክትባቶችን ለማዘጋጀት የተሻሻሉ ስልቶች
በኤምአርኤን በራሱ ደካማ መረጋጋት፣ በቲሹዎች ውስጥ በኒውክሊየስ በቀላሉ መበላሸት፣ አነስተኛ የሕዋስ መግቢያ ቅልጥፍና እና ዝቅተኛ የትርጉም ቅልጥፍና፣ እነዚህ ጉድለቶች የ mRNA ክትባቶችን መተግበርን ይገድባሉ።የትርጉም ቅልጥፍና በጣም ወሳኝ ሚና ይጫወታል.የማጓጓዣ ተሽከርካሪዎች በቫይራል ቬክተር እና ቫይረስ ያልሆኑ ቬክተሮች (ሊፕሶሶም, ሊፖሶም ያልሆኑ, ቫይረሶች, ናኖፓርቲሎች, ወዘተ ጨምሮ) ሊከፋፈሉ ይችላሉ.ስለዚህ, ተዛማጅ የማሻሻያ እርምጃዎች ያስፈልጋሉ.የሚከተለው ለ mRNA ዝግጅት ፋርማኮሎጂካል ማሻሻያ ስትራቴጂ ነው።[2]
1 ኤምአርኤን ለማረጋጋት እና የፕሮቲን ትርጉምን ለመጨመር ከ eukaryotic translation initiation factor 4E (EIF4E) ጋር በማያያዝ የካፕ አናሎጎችን ማዋሃድ ወይም ካፕ ኢንዛይሞችን ይጠቀሙ።
2 ኤምአርኤን ለማረጋጋት እና የፕሮቲን ትርጉም ለመጨመር በ5′-ያልተተረጎመ ክልል (UTR) እና 3′-UTR ያሉትን ንጥረ ነገሮች ያስተካክሉ
3 ፖሊ(A) ጅራት መጨመር ኤምአርኤን እንዲረጋጋ እና የፕሮቲን ትርጉም እንዲጨምር ያደርጋል
4 የተሻሻሉ ኑክሊዮሳይዶች በተፈጥሮ በሽታ የመከላከል አቅምን ለመቀነስ እና ትርጉምን ለመጨመር
5 በ RNase III እና በፈጣን ፕሮቲን ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ (ኤፍ.ፒ.ኤል.ኤል.) ማፅዳት በሽታ የመከላከል አቅምን ይቀንሳል እና ትርጉምን ይጨምራል።
6 ትርጉምን ለመጨመር ቅደም ተከተሎችን ወይም ኮዶችን ያመቻቹ
7 የትርጉም አጀማመር ምክንያቶች እና ሌሎች የትርጉም እና የበሽታ መከላከያ ዘዴዎችን በጋራ ማድረስ
ምስል 4፡ በብልቃጥ ግልባጭ (IVT) mRNA የማምረት እና የመገጣጠም ሂደት [5]
የፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ መጠነ-ሰፊ ዝግጅት
የፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ ማጽዳት በዋናነት እንደ አር ኤን ኤ፣ ክፍት ክብ ዲ ኤን ኤ ኢንዶቶክሲን፣ ፕሮቲን እና አስተናጋጅ ኑክሊክ አሲድ ያሉ ብከላዎችን ያስወግዳል፣ እና አብዛኛውን ጊዜ recombinant plasmid ወደ ኢ.ኮላይ ይለውጣል።ኮላይ ከፍተኛ መጠን ያለው ፍላት፣ ከዚያም ጠንካራ ፈሳሽ መለያየት እና የኢ.ኢ. ኮላይ በአልካላይን ሊሲስ ፣ ሴንትሪፉጋል ጠንካራ-ፈሳሽ መለያየት እና ከሊሲስ በኋላ ማይክሮፋይልትሬሽን ፣ ከማብራራት በኋላ የአልትራፋይልቴሽን እና ትኩረትን እና ከዚያም ክሮሞቶግራፊን ማፅዳትን ያጠቃልላል።
የፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ ማጽዳት;
Foregene አጠቃላይ Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.ኤምአርኤን疫苗研究进展及挑战[ጄ]免疫学杂志, 2016 (05): 446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, እና ሌሎች.mRNA ክትባቶች - በክትባት ውስጥ አዲስ ዘመን [J].ተፈጥሮ የመድኃኒት ግኝትን ይገመግማል፣ 2018።
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) የ RNA ክትባቶች መግቢያ.ውስጥ፡ Kramps T.፣ Elbers K. (eds) RNA ክትባቶች።ዘዴዎች በሞለኪውላር ባዮሎጂ, ጥራዝ 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.ኤምአርኤን ተላላፊ በሽታዎችን ለመቆጣጠር ለክትባት ልማት እንደ ትራንስፎርሜሽን ቴክኖሎጂ [J].ሞለኪውላር ቴራፒ፣ 2019
【5】ሰርጂዮ ሊናሬስ-ፌርናንዴዝ፣ ሴሊን ላክሮክስ፣፣የኤምአርኤን ክትባት የተፈጥሮ/አስማሚ የበሽታ መቋቋም ምላሽን ማበጀት፣በሞለኪውላር ሕክምና ውስጥ ያሉ አዝማሚያዎች፣ጥራዝ 26፣ እትም 3,2020፣ገጽ 311-323።
የልጥፍ ሰዓት፡- ኦገስት-05-2021
