የ PCR ዘዴዎች እና የኒውክሊክ አሲድ ኤሮሶል ብክለት በኒውክሊክ አሲድ መሞከሪያ ላቦራቶሪዎች ውስጥ የአንድ ሳንቲም ሁለት ገጽታዎች ናቸው.ልንመርጠው ወይም ላለማድረግ ብቻ ነው፣ ነገር ግን ፈልገን ወይም አውጥተን መምረጥ አንችልም።

1. የዲኤንኤ ማስወገጃ ማጣሪያ

የኑክሊክ አሲድ ኤሮሶል ብክለትን በቦታ ለማስወገድ በመጀመሪያ በፈሳሽ ሁኔታ ውስጥ ኑክሊክ አሲዶችን ሊያስወግዱ የሚችሉ የዲ ኤን ኤ ማስወገጃዎችን ማጣራት ያስፈልጋል።ምክንያቱም በትክክል የሚሰሩ ብዙ የዲኤንኤ ማስወገጃዎች የሉም።ለሙከራ ዘዴ፣ እባክዎን ይመልከቱ፡ የዲኤንኤ ማስወገጃ የላብራቶሪ "ምስጢር ጥግ" ሊሆን አይችልም!

በዚህ ሙከራ 100 ኮፒ/μL (ሲቲ በግምት 31) የ ASFV ፕላዝማድ እና የዲኤንኤ ማስወገጃ በዲጂታል PCR የሚለካው በእኩል መጠን ተቀላቅለው በክፍል ሙቀት ለ10min፣ 20min እና 30min በቅደም ተከተል ምላሽ ሰጥተዋል።ከኒውክሊክ አሲድ ማውጣት በኋላ, qPCR ማጉላት ተካሂዷል.ከፕላዝሚድ እና ከውሃ ጋር የተቀላቀለ አወንታዊ ቁጥጥር ተነጻጽሯል.ሙከራው በተመሳሳይ ጊዜ ስላልተጠናቀቀ በውጤቶቹ መካከል የተወሰነ ልዩነት ሊኖር ይችላል, ነገር ግን በሙከራው መደምደሚያ ላይ ተጽዕኖ አያሳድርም.እስካሁን፣ 10 የንግድ ዲኤንኤ ማስወገጃ ምርቶችን ገምግሜአለሁ።ቁጥር 1, ቁጥር 6 እና ቁጥር 8 ምርቶች ብቻ የፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ በፈሳሽ ሁኔታ ውስጥ ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያበላሹ ይችላሉ.ሌሎች ምርቶች ማለት ይቻላል ምንም ውጤት የላቸውም.

ሠንጠረዥ 1 በንግድ የሚገኝ የዲኤንኤ ማስወገጃ ኑክሊክ አሲድ የማስወገድ ውጤት

2. በብዛት ጥቅም ላይ የዋሉ ፀረ ተባይ መድኃኒቶች የዲኤንኤ የማስወገድ ውጤት ሙከራ

1. በብዛት ጥቅም ላይ የዋሉ ፀረ-ተባይ መድሃኒቶችን ማጣራት

በቤተ ሙከራ ውስጥ በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉ ብዙ አይነት ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች አሉ፡- aldehydes፣ phenols፣ alcohols፣ quaternary ammonium salts፣ peroxides፣ ክሎሪን ዝግጅቶች፣ እና አሲዶች እና መሠረቶች።እነዚህ ፀረ-ተህዋሲያን ረቂቅ ተሕዋስያን ላይ የሚያደርሱት ፀረ-ተፅእኖ ሙሉ በሙሉ በሙከራዎች የተረጋገጠ ቢሆንም በኑክሊክ አሲዶች መበላሸት ላይ ምንም በቂ የሙከራ መረጃ የለም።የኒውክሊክ አሲድ መፈተሻ ላቦራቶሪዎች በጥቃቅን ተሕዋስያን ላይ ጥሩ የፀረ-ተባይ ተጽእኖ ብቻ ሳይሆን ዲ ኤን ኤ ሊቀንስ የሚችል ፀረ-ተባይ ያስፈልጋቸዋል.የምርመራው ውጤት እንደሚያሳየው ሁለት የክሎሪን ዝግጅቶች 84 ፀረ-ተባይ እና ትሪክሎሮሶሲያዩሪክ አሲድ እና 1 ሜ ሃይድሮክሎሪክ አሲድ መስፈርቶቹን የሚያሟሉ ናቸው።1 ሜ ሃይድሮክሎሪክ አሲድ በጣም የሚበላሽ ስለሆነ የክሎሪን ዝግጅቶች በኑክሊክ አሲድ መሞከሪያ ላቦራቶሪዎች ውስጥ እንደ ቆሻሻ ማስወገጃ እንዲጠቀሙ ይመከራል።ይሁን እንጂ የክሎሪን ዝግጅቶች ለብረታ ብረት የሚበላሹ ናቸው እና መሳሪያዎችን እና መሳሪያዎችን ለማጽዳት ጥቅም ላይ ሊውሉ አይችሉም.

ሠንጠረዥ 2 የተለያዩ አይነት ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች የዲኤንኤ ማስወገጃ ውጤቶች

2. ዝቅተኛው ውጤታማ የክሎሪን ዝግጅቶች ስብስብ

በክሎሪን ላይ የተመሰረቱ ፀረ-ተውሳኮች ጠንካራ የዲ ኤን ኤ መበላሸት ተፅእኖ አላቸው, ነገር ግን በብረት ብስባታቸው እና ብስጭታቸው ምክንያት, ወለሉን, የብረት ያልሆኑ የጠረጴዛዎችን, የሶኪንግ ምክሮችን, የሴንትሪፉጅ ቱቦዎችን እና ሌሎች የሙከራ እቃዎችን ለማጽዳት ሊያገለግሉ ይችላሉ.

በ "አዲሱ የኮሮናሪ የሳንባ ምች ወረርሽኝ በሽታ መከላከያ ቴክኒካል መመሪያዎች" መሰረት: ብክለት (የታካሚዎች ደም, ፈሳሽ እና ማስታወክ) ክሎሪን 5g / L-10g / L ክሎሪን የያዘ ፀረ-ተባይ;ወለል፣ ግድግዳ እና የቁስ ወለል የሚገኘውን ክሎሪን 1g/L ክሎሪን ፀረ-ተህዋሲያን ይጠቀማሉ፡ አልባሳት፣አልጋ እና ሌሎች ጨርቃጨርቅ በመጀመሪያ በክሎሪን ፀረ-ተባይ በ0.5g/L ክሎሪን ለ30 ደቂቃዎች ጠልቀው ከዚያም እንደተለመደው ይጸዳሉ።

ሠንጠረዥ 3 የተለያዩ የክሎሪን ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች ዲኤንኤ የማስወገድ ውጤት

የምርመራው ውጤት እንደሚያሳየው ውጤታማ የክሎሪን ክምችት ከ 1.2 ግራም / ሊትር በላይ ወይም እኩል ከሆነ, ክሎሪን የያዘው ፀረ-ተባይ መድሃኒት ለ 5 ደቂቃዎች ጥቅም ላይ ሲውል 100 ኮፒ / μL ፕላዝማይድ ሙሉ በሙሉ ሊቀንስ ይችላል.ለ 10 ደቂቃዎች በሚሰራበት ጊዜ, ከ 0.6 ግ / ሊትር በላይ ወይም እኩል የሆነ ውጤታማ የክሎሪን ክምችት ያለው 84 ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች 100 ኮፒ/ማይክል ፕላዝማይድ ሙሉ በሙሉ ሊቀንስ ይችላል.

3. በኑክሊክ አሲድ ኤሮሶል የተበከለ የአየር ማስወገጃ ሙከራ

በኒውክሊክ አሲድ ኤሮሶል የተበከለውን አየር እንዴት ማፅዳት ይቻላል?አብዛኛዎቹ ሃሳቦች በኤሮሶል የተበከለ አካባቢን መፍጠር እና ከዚያም ማጽዳት, ወይም ከብክለት በኋላ ኑክሊክ አሲዶችን ማጽዳት ናቸው.ለእኔ አንድ ሙከራ ሊደገም የማይችል እና የሙከራው ውጤት በቁጥር ሊተነተን የማይችል ትርጉም የለሽ ነው ፣ ስለሆነም አንዳንድ የፀረ-ተባይ አየር መከላከያ ዘዴዎችን ወሰድኩ።"GB27948-2020 ለአየር ተከላካይ አጠቃላይ መስፈርቶች" እና "የበሽታ መከላከያ ቴክኒካዊ ዝርዝሮች" ይመልከቱ

1. የሙከራ ቁሳቁሶች

1.1 የዲኤንኤ ማስወገጃ፡ በዚህ ሙከራ፣ በሰንጠረዥ 1 ውስጥ 6 እና 8 በንግድ የሚገኙ ሁለት ዲኤንኤ ማስወገጃዎች ተመርጠዋል።

1.2 የሙከራ ፕላዝማድ፡ የአብዛኛው የላብራቶሪ ብክለት የሲቲ ዋጋ ከ30 በላይ እንደሚሆን ግምት ውስጥ በማስገባት፣ በዚህ ጊዜ ጥቅም ላይ የዋለው የ ASFV ጂን ፕላዝማይድ መጠን 100 ኮፒ/μL ያህል ነው፣ እና የፍሎረሰንት መጠናዊ PCR CT ወደ 31.07 ነው።ፕላዝማዱን ወደ መንጋው ጥጥ በጥጥ ጨምር እና አየር ማድረቅ።

1.3 የሙከራ መሣሪያ፡- በሼንዘን ሩንሊያን ኢንቫይሮንሜንታል ቴክኖሎጅ Co., Ltd. በደግነት የሚደገፈው የቢሊንግኬሃን KVBOX መከላከያ መሳሪያ በሃይድሮጂን ፓርሞክሳይድ ፀረ ተባይ አማካኝነት እጅግ በጣም ጥሩ የአየር መከላከያ አፈጻጸም አለው፣ እና ስፖሮችን እና ሌሎች ረቂቅ ህዋሳትን በብቃት ሊገድል ይችላል።

1.4 የሙከራ ቦታ፡ ወደ 0.1 ኪዩቢክ ሜትር የሚደርስ የተዘጋ የዝውውር መስኮት።

2. የሙከራ ዘዴ

በፀረ-ተባይ ማሽኑ ላይ የተቀመጠው የንጽህና መጠበቂያ መጠን 10ml, እና ትኩረቱ 100ml/m3 ነው, ይህም ከ "GB27948-2020 አጠቃላይ የአየር ማጽጃዎች መስፈርቶች" በጣም ከፍ ያለ ነው-ኤሮሶል የሚረጭ ፀረ-ተባይ መከላከያን በሚጠቀሙበት ጊዜ, የንጽህና መጠኑ ≤10 ml / m3 መሆን አለበት.