1፡ የሙከራ አቅርቦቶችን በጊዜ ይተኩ

(NTC) አሉታዊ ቁጥጥርን ያዋቅሩ እና ብዙ ጊዜ ይድገሙት።በቤተ ሙከራ ውስጥ የ PCR ምርት ብክለት እንዳለ ከታወቀ በኋላ ሁሉንም የሙከራ አቅርቦቶች በጊዜ ይተኩ.እንደ: ድጋሚ ማቅለጥ እና ፕሪመር ማዘጋጀት, የ pipette ጫፍ, EP tube, ddH2O, ወዘተ እንደገና ማምከን, በአዲስ pipette መተካት እና ለጊዜው PCR ሙከራዎችን ለማድረግ ሌሎች ላቦራቶሪዎች መበደር.ሙከራውን ከመቀጠልዎ በፊት የ PCR ምርት ብክለት እስኪወገድ ድረስ የተበከለው ላቦራቶሪ አየር እንዲወጣ እና በአልትራቫዮሌት ጨረሮች እንዲሰራጭ መደረግ አለበት.

2: የ UV መጋለጥ ጊዜን ያራዝሙ

የዲኤንኤ ብክለትን ለማስወገድ መደበኛ የአልትራቫዮሌት ጨረሮች ከወትሮው በ 2 ሰዓታት ውስጥ ማራዘም እንዳለበት ልብ ሊባል ይገባል.ይህም ሆኖ፣ የUV irradiation ትንንሽ ቁርጥራጮችን (ከ200ቢፒ በታች) የዲኤንኤ ብክለትን በማስወገድ ላይ ያለው ተጽእኖ አሁንም ጥሩ አይደለም።

የአልትራቫዮሌት ሞገድ ርዝመት (nm) በአጠቃላይ 254/300nm ነው, እና ለ 30 ደቂቃዎች ያህል ለማብራት በቂ ነው.የተቀሩትን PCR ምርቶች ብክለትን ለማስወገድ UV በሚመርጡበት ጊዜ የ PCR ምርት ርዝመት እና በምርት ቅደም ተከተል ውስጥ የመሠረቶችን ስርጭት ግምት ውስጥ ማስገባት እንደሚገባ ልብ ሊባል ይገባል.UV irradiation ውጤታማ የሚሆነው ከ 500 bp በላይ ለሆኑ ረጅም ቁርጥራጮች ብቻ ነው, እና በአጭር ቁርጥራጮች ላይ ትንሽ ተጽእኖ የለውም.

በአልትራቫዮሌት ጨረር ወቅት፣ በ PCR ምርት ውስጥ ያሉት የፒሪሚዲን መሠረቶች ዲመሮች ይፈጥራሉ።እነዚህ ዲመሮች ማራዘሚያውን ሊያቋርጡ ይችላሉ, ነገር ግን በዲ ኤን ኤ ሰንሰለት ውስጥ ያሉ ሁሉም ፒሪሚዲኖች ዳይመርሮችን ሊፈጥሩ አይችሉም, እና UV irradiation ደግሞ ዲመሮችን ሊሰብር ይችላል..የዲመር ምስረታ ደረጃ በ UV የሞገድ ርዝመት, በፒሪሚዲን ዲመር አይነት እና ከዲመር ጣቢያው አጠገብ ባለው የኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ይወሰናል.ስለዚህ, የ PCR አምፕሊፋይድ ቁርጥራጮች ትንሽ ከሆኑ, የ UNG ፀረ-PCR ምርት ብክለት ስርዓት እንዲጠቀሙ ይመከራል.

3፡ በብዛት ጥቅም ላይ የዋሉ የዲኤንኤ ብክለት አጭበርባሪዎች

ኤሮሶሎች ፓይፕ ሲጨመሩ በቀላሉ ይፈጠራሉ, ይህም ለማስወገድ አስቸጋሪ ነው, እና በፍጥነት ይረጋጋል.ስለዚህ የዲኤንኤ ብክለትን ለመከላከል ልዩ የዲ ኤን ኤ ብክለትን አዘውትሮ መጠቀም ጥሩ ምርጫ መሆኑ አያጠራጥርም።

4፡ UNG ፀረ-ብክለት ስርዓትን ተጠቀም

የ PCR ምርት ብክለት ከተወገደ በኋላ፣ የፍተሻ ላቦራቶሪ የ PCR ምርትን መበከል ለመከላከል የ UNG ፀረ-PCR ምርት ብክለት ስርዓትን መጠቀም ይችላል።በአጠቃላይ የላቦራቶሪዎች ውስጥ ቀላል የሙከራ ክፍልፋዮችን ማከናወን, የ PCR ምርትን አካባቢ ከሌሎች አካባቢዎች በጥብቅ መለየት, የተወሰኑ የላቦራቶሪ ህጎችን እና ደንቦችን ማቋቋም እና የ PCR ምርትን መበከል ለመከላከል ተገቢውን ስልጠና ማካሄድ ይችላሉ.

ምክሮች፡ ምክንያታዊ PCR ላብራቶሪ ማቋቋም፣ ጥሩ PCR አካባቢን መጠበቅ፣ መደበኛ PCR የአሰራር ሂደቶችን መቅረፅ እና የተሞካሪዎችን ጥብቅ የስራ ግንዛቤ ማዳበር የ PCR ሙከራዎችን ብክለት ለመከላከል ወይም ለመቀነስ ቁልፍ ናቸው።