ደራሲዎች: Wang Xiaoyan, Zhao Eryu

ክፍል፡- Jiaozhou ሆስፒታል፣ ዶንግፋንግ ሆስፒታል ከቶንግጂ ዩኒቨርሲቲ ጋር የተያያዘ

በአሁኑ ጊዜ የመተንፈሻ አካልን በሽታ አምጪ ኒዩክሊክ አሲድ ለመለየት ዋናው የናሙና ዓይነት የጉሮሮ መቁሰል ነው.ብዙ አይነት በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉ የናሙና ማቆያ መፍትሄዎች አሉ, ሁሉም ለመጓጓዣ እና ለማከማቻ ማቀዝቀዣ ወይም በረዶ መሆን አለባቸው;በመሰብሰብ እና በማጓጓዝ ሂደት ውስጥ አጠቃላይ የሙቀት መጠኑን ለመቆጣጠር አስቸጋሪ ነው, እና ናሙና ከመሞከርዎ በፊት የጥራት ቁጥጥርን ማረጋገጥ አስቸጋሪ ነው.^[1-2].

RNase (RNase) አር ኤን ኤ ሃይድሮላይዝስ የሚያደርግ ኢንዶኑክሊዝ ሲሆን በዋናነት በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን የፎስፎዲስተር ቦንዶችን የሚቆርጥ ነው።የ RNase ሞለኪውል በጣም የተረጋጋ ነው, በመዋቅሩ ውስጥ የዲሰልፋይድ ቦንዶች አሉ, እና እንቅስቃሴው የዲቫሌንት cations መኖሩን አይፈልግም, ስለዚህ RNase በቀላሉ አይገለበጥም, እና ከፍተኛ ሙቀት ወይም የዲንቴንስ አጠቃቀምን እንኳን እንደገና ማደስ ቀላል ነው.RNases endogenous እና exogenous ተብለው ተከፍለዋል።ህዋሳት ሲቀደዱ የውስጣዊው አር ናሴስ በተመሳሳይ ጊዜ ሊለቀቁ ይችላሉ።ስለዚህ, የውስጣዊ አር ኤን ኤዎች ሚናን ማስወገድ በአር ኤን ኤ ማውጣት ሂደት ውስጥ በጣም ወሳኝ እርምጃ ነው.Exogenous RNases በሰፊው ተሰራጭተዋል።አር ኤን ኤዎች በአየር፣ በሰው ቆዳ፣ በፀጉር እና በምራቅ ውስጥ ይገኛሉ፣ እነዚህም ለአር ኤን ኤ በቀላሉ መበላሸት ወሳኝ ምክንያቶች ናቸው።^[3].

የውሂብ ጥያቄ

CANS-CL02-A009 "በሞለኪውላር ዲያግኖሲስ መስክ የሕክምና ላቦራቶሪ ጥራት እና የብቃት ማረጋገጫ መመሪያዎች አተገባበር" በቴክኒካዊ መስፈርቶች ውስጥ ተገቢ የውኃ ጥራት ደረጃዎች በማመልከቻው መሰረት እንዲዘጋጁ ያቀርባል;ሊጣሉ የሚችሉ የአየር መከላከያ መያዣዎች;

RNase/መመደብ

(1) አርናሴ ኤ

Ribonuclease A (RNase A) ከቦቪን ፓንችስ የተገኘ ኢንዶሪቦኑክሊዝ ሲሆን በተለይም የ3′ የፒሪሚዲን ቅሪቶችን በአር ኤን ኤ ላይ ሊያጠቃ የሚችል ሳይቶሲን ወይም ዩራሲል በአጎራባች ኑክሊዮታይድ የተሰራ ነው።ፎስፎዲስተር ቦንድ፣ የምላሹ የመጨረሻ ምርት 3′ ፒሪሚዲን ኑክሊዮታይድ እና ኦሊጎኑክሊዮታይድ ከ3′ ፒሪሚዲን ኑክሊዮታይድ ጋር ነው።

(2) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) ከ Aspergillus orjzae የተገኘ ነው፡ በተለይ በ3′ ተርሚናል የጉዋኒን ፎስፌት ላይ ይሰራል፣ እና የመለያያ ቦታው በ3′ የጉዋኒን ፎስፌት እና 5′ ሃይድሮክሳይል ከጎን ያሉት ኑክሊዮታይድ ነው።የምላሹ የመጨረሻ ምርት 3′guanylic acid እና oligonucleotide ቁርጥራጭ ከ3′ ጓኒሊክ አሲድ ጋር ነው።

(3) አርናሴ ኤች

Ribonuclease H (RNase H) በመጀመሪያ የተገኘው ከጥጃ ታይምስ ቲሹ ነው፣ እና ኢንኮዲንግ ጂን ወደ Escherichia ኮላይ ተቀይሯል።በተለይ ዲኤንኤውን ሊያዋርድ ይችላል፡ በአር ኤን ኤ ዲቃላ ዱፕሌክስ ውስጥ ያሉ የአር ኤን ኤ ክሮች፣ በዚህም ምክንያት ኦሊጎኑክሊዮታይድ እና ሞኖኑክሊዮታይድ 3′-OH እና 5′-monophosphate ends ያላቸው፣ ነጠላ ወይም ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤን ዝቅ ማድረግ አይችልም።

RNase

ተግባር እና አጠቃቀም

Ribonuclease የሪቦኑክሊክ አሲድ (አር ኤን ኤ) መበስበስን ሊያመጣ ይችላል እና ሰው ሰራሽ በሆነ መንገድ ሊዋሃድ ይችላል።የመድሐኒት ቅባት ለጉዳት እና ለመገጣጠሚያ ህመም ለማከም በአካባቢው ጥቅም ላይ ይውላል.እንደ ሪፖርቶች ከሆነ ራይቦኑክሊዝ የሴል ሜታቦሊዝምን ሊለውጥ ይችላል, የቫይረስ ውህደትን ይከለክላል, የኢንፍሉዌንዛ ቫይረስ በብልቃጥ ውስጥ እንዳይሰራጭ እና በዶሮ ሽሎች ውስጥ የቫኪኒያ እና የሄርፒስ ቫይረስ መፈጠርን ይከላከላል.ራይቦኑክሊዝ በየቀኑ 180 ሚሊ ግራም በጡንቻ ውስጥ በመርፌ ክሊኒካዊ ጥቅም ላይ ይውላል ፣ ለወረርሽኝ የኢንሰፍላይትስ ሕክምና ጠቃሚ ፣ ribonuclease የሪቦኑክሊክ አሲድ (አር ኤን ኤ) መበስበስን ሊያመጣ ይችላል እና አሁን በሰው ሰራሽ መንገድ ሊዋሃድ ይችላል።የመድሐኒት ቅባት ለጉዳት እና ለመገጣጠሚያ ህመም ለማከም በአካባቢው ጥቅም ላይ ይውላል.እንደ ሪፖርቶች ከሆነ ራይቦኑክሊዝ የሴል ሜታቦሊዝምን ሊለውጥ ይችላል, የቫይረስ ውህደትን ይከለክላል, የኢንፍሉዌንዛ ቫይረስ በብልቃጥ ውስጥ እንዳይሰራጭ እና በዶሮ ሽሎች ውስጥ የቫኪኒያ እና የሄርፒስ ቫይረስ መፈጠርን ይከላከላል.በየቀኑ 180 ሚሊ ግራም በጡንቻዎች ውስጥ የሪቦኑክሊዝ ክሊኒካዊ አጠቃቀም ለወረርሽኝ ኤንሰፍላይትስ ሕክምና ጠቃሚ ነው።

RNase

አነቃቂ ፍቺ

የ RNase inhibitor ዩኒት ትርጉም፡ የ 5ng RNase A እንቅስቃሴን 50% ለመግታት የሚያስፈልገው የኢንዛይም መጠን አንድ ክፍል ነው።

RNase Inhibitors እንዴት እንደሚሠሩ

ጉዋኒዲን አይሶቶዮሲያናቴ;

Guanidine isothiocyanate የሞለኪውል ቀመር C2H6N4S ያለው ኦርጋኒክ ውህድ ነው።በዋነኛነት በባዮሎጂካል ሕክምና ፣ በኬሚካል ሬጀንቶች ፣ ወዘተ. Guanidine isothiocyanate የፕሮቲን ሊንሲንግ ወኪል ነው ፣ እና ብዙውን ጊዜ በሞለኪውላዊ ዲያግኖስቲክ ሪጀንቶች ውስጥ የሊሲስ መፍትሄ ዋና አካል ሆኖ ያገለግላል።ቲሹን ሊይዝ ይችላል፣ የሕዋስ አወቃቀሩን ያጠፋል እና ኑክሊክ አሲድን ከኑክሊዮፕሮቲን ያመነጫል፣ እና ወደ አር ናሴ ጠንካራ የ denaturation አለው።በአሁኑ ጊዜ በጣም ውጤታማው RNase inhibitor ነው.

TRIzol አጠቃላይ አር ኤን ኤ ከሴሎች ወይም ቲሹዎች በቀጥታ ማውጣት የሚችል ልብ ወለድ አጠቃላይ የአር ኤን ኤ ኤክስትራክሽን reagent ነው።ሴሎችን በፍጥነት ሊያበላሹ እና በሴሎች የሚለቀቁ ኒዩክሊሶችን የሚገቱ እንደ ፌኖል እና ጓኒዲን ኢሶቲዮሲያኔት ያሉ ንጥረ ነገሮችን ይዟል።

(ይሁን እንጂ ጓኒዲን ኢሶቲዮሲያኔት ለላቦራቶሪ ተመራማሪዎች ጤና አደገኛ ነው።)

አርናሲን፡

ከአይጥ ጉበት ወይም ከሰው ብላቶደርም የወጣ አሲድ ግላይኮፕሮቲን።Rnasin ተወዳዳሪ ያልሆነ የ RNase inhibitor ነው፣ ይህም ከተለያዩ RNases ጋር በማያያዝ እነሱን ለማንቃት ነው።

(ተጨማሪ ዝርዝሮች፡https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hዝቅተኛ የሙቀት መጠን;

ከፍተኛ ሙቀት እንዲሁ የተለመደ የፕሮቲን ዲንቴሽን ዘዴ ነው።

ዲኤቲሊፒሮካርቦኔት (DEPC)፦

DEPC ጠንካራ ነገር ግን ያልተሟላ RNase inhibitor ነው፣ ይህም የ RNase እንቅስቃሴን የሚገታ ከ RNase ንቁ ቡድን አሚኖ አሲድ ጋር በማጣመር ፕሮቲኖችን ያስወግዳል።

የቫናዲል ራይቦኑክሊዮሳይድ ውስብስብ;

በቫናዲየም ኦክሳይድ አየኖች እና ኑክሊዮሲዶች የተሰራ ውስብስብ ፣ ከ RNase ጋር በሽግግር ንጥረ ነገሮች መልክ የሚገናኝ ፣ የ RNase እንቅስቃሴን ሙሉ በሙሉ ሊገታ ይችላል

ሌላ:

ኤስ.ዲ.ኤስ፣ ዩሪያ፣ ዲያቶማስየም ምድር፣ ወዘተ. በተጨማሪም በ RNase ላይ የተወሰነ የመከላከያ ውጤት አላቸው።

የባለሙያዎች ግምገማዎች

ሊ ዩጂ ዋና ቴክኒሻን

የላቦራቶሪ ዲፓርትመንት ዳይሬክተር, Jiaozhou ሆስፒታል, ዶንግፋንግ ሆስፒታል Tongji ዩኒቨርሲቲ ጋር የተያያዘ

ኤግዚቢሽኑ RNase እንዳይበከል ለመከላከል፣ በአር ኤን ኤ ማውጣት ሂደት ውስጥ ጭምብል፣ ጓንት እና ኮፍያ ለብሰው ብዙ ጊዜ መተካት አለባቸው።ሁሉም የብርጭቆ እቃዎች በ 200 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ ከ 2 ሰአታት በላይ በማድረቂያ ምድጃ ውስጥ መጋገር አለባቸው.ለመጋገር የሚያገለግሉ እንደ ፕላስቲክ ያሉ ቁሳቁሶች በ DEPC ውሃ መታከም እና ከዚያም በንፋስ ውሃ መታጠብ አለባቸው.አር ኤን ለማውጣት፣ ለመጠበቅ እና ለመለየት የሚያገለግሉት ሪጀንቶች ወይም መሳሪያዎች ለአር ኤን ኤ መሰጠት አለባቸው፣ እና ራሱን የቻለ የአር ኤን ኤ የሚሰራ ቦታ መዘጋጀት አለበት።

ማጣቀሻዎች፡-

[1] Smith-Vaughan HC፣ Binks MJ፣ Beissbarth J፣ et al.በአውስትራሊያ ተወላጆች [J] ውስጥ አጣዳፊ የታችኛው የመተንፈሻ አካላት ኢንፌክሽኖች ከመከሰታቸው በፊት ወዲያውኑ በ nasopharynx ውስጥ ያሉ ባክቴሪያ እና ቫይረሶች።ዩሮ ጄ ክሊን ማይክሮባዮል ኢንፌክሽን ዲስ,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] የቻይና መከላከያ ሕክምና ማህበር የሆስፒታል ኢንፌክሽን መቆጣጠሪያ ቅርንጫፍ።የክሊኒካዊ ጥቃቅን ተሕዋስያን ናሙናዎችን ለመሰብሰብ እና ለመመርመር መመሪያዎች [J].የቻይንኛ ጆርናል ኦቭ ሆስፒታል ኢንፌክሽን, 2018 (20): 3192-3200.

[3] "ክሊኒካዊ ሙከራ አሥር ሺህ ለምን የሞለኪውላር ባዮሎጂ ሙከራ መጠን"