መግቢያ፡-

አር ኤን ኤ፣ የሳይንስ ስም ራይቦኑክሊክ አሲድ፣ ምህጻረ ቃሉ የመጣው ከሪቦኑክሊክ አሲድ ነው፣ ቢያንስ በደርዘን የሚቆጠሩ ራይቦኑክሊክዮታይዶችን በፎስፎዲስተር ቦንዶች በማገናኘት የሚቋቋም ኑክሊክ አሲድ ነው።

አር ኤን ኤን የመመርመር መነሻው ከብክለት ነፃ የሆነ አጠቃላይ አር ኤን ለማውጣት ነው፣ እና የአር ኤን ኤ ማውጣት መሰረታዊ መርህ በሚከተለው መልኩ ሊጠቃለል ይችላል።

1. መጀመሪያ ሴሎቹን ያበላሹ

2. ከዚያም የማክሮ ሞለኪውላር ቆሻሻዎችን (ፕሮቲን፣ ቅባት፣ ዲኤንኤ፣ ወዘተ) ያስወግዱ።

3. በመጨረሻም አር ኤን ኤ ጨዎችን እና ኦርጋኒክ መሟሟያዎችን በማስወገድ እና አር ኤን ኤውን የበለጠ በማጽዳት ላይ ነው.

የማውጣት ዘዴ ያለፈው እና አሁን

የመጀመሪያው ትውልድ አር ኤን ኤ ማውጣት ዘዴ TRIzol የዝናብ ዘዴ ነው (ያገለገሉት ሪጀንቶች guanidine isothiocyanate, phenol, ክሎሮፎርም, ወዘተ. ያካትታሉ.) ፒዮትር ቾምቺንስኪ እና አያት ኒኮሌታ ሳቺ በሚባሉ አያት የፈለሰፉት ይህ ፈጠራ አር ኤን ኤ ማውጣት ፈጣን እና ቀላል ምርምርን ስለሚያስችል ከዚያን ጊዜ ጀምሮ የአር ኤን ኤ መነሳሳትን ከጀመረ ጀምሮ።

በኋላ, አያት ይህንን የፈጠራ ባለቤትነት ለኢንቪትሮጅን ሸጠ, እና ኢንቪትሮጅን ይህን ዘዴ ለአለም አስተዋወቀ እና በሰፊው ጥቅም ላይ የዋለ ዘዴ ሆነ.

በኋላ ኢንቫይትሮጅን በቴርሞ!

ተወካይ ምርት: ​​Invitrogen's TRIzol reagent

ይሁን እንጂ የ TRIzol የዝናብ ዘዴ ብዙ ዝናብ እና አር ኤን ኤ ማውጣትን ይጠይቃል, እና ጥቅም ላይ የዋሉት ሬጀንቶች መርዛማ ናቸው እና ለመሥራት ረጅም ጊዜ ይወስዳሉ.

ስለዚህ የሁለተኛው ትውልድ አምድ-ኢንዛይም የማጥራት ዘዴ የሲሊካ ጄል ሽፋንን እንደ የተለየ ኑክሊክ አሲድ ማስታዎቂያ ማቴሪያል በመጠቀም በአናሙናው ውስጥ የሚገኘውን አር ኤን ኤ ወደ ከፍተኛ ደረጃ በመመለስ ሌሎች ቆሻሻዎችን በማስወገድ ላይ ይገኛል።

የሁለተኛው ትውልድ ዘዴ በተረጋጋ አፈፃፀም ላይ በመመስረት ቀዶ ጥገናውን ቀላል ያደርገዋል, የአደጋ መንስኤን ይቀንሳል እና የአር ኤን ኤ ማውጣትን ያሻሽላል.

ተወካይ ምርቶች: QIAGEN RNeasy እና አብዛኛዎቹ የሀገር ውስጥ ምርቶች

ይሁን እንጂ የዲኤንኤ ብክለትን ለማስወገድ ሁለቱም የመጀመሪያው እና ሁለተኛ ትውልድ ዘዴዎች ዲኤንኤሴን መጠቀም ይጠይቃሉ, ይህም ለቀጣይ የታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች አንዳንድ ምቾት ያመጣል.ቀሪው ዲ ኤን ኤ የተገላቢጦሽ ግልባጭን ውጤታማነት ይቀንሳል እና የመጀመርያውን ሲዲኤንኤ ውህደት ይቀንሳል፣ በዚህም የውጤቶቹን ትክክለኛነት ይነካል።

ስለዚህ, የሶስተኛው ትውልድ የማውጣት ዘዴ በሁለተኛው ትውልድ ላይ የተመሰረተ ነው.ሙከራው ምንም ኢንዛይሞችን መጨመር አያስፈልገውም, እና አር ኤን ኤ በቀላሉ በሁለት አምዶች ብቻ ሊገኝ ይችላል.

አምድ 1፡ ዲ ኤን ኤ ለማጽዳት ዓምድ

አምድ 2፡ አር ኤን ኤ-ብቻ አምድ በተለይ አር ኤን ኤን ያዳብራል እና ያድሳል

እንዲህ ዓይነቱ ቀላል ቀዶ ጥገና ጊዜን ብቻ ሳይሆን የታችኛውን ተፋሰስ ሙከራዎችን ያመቻቻል!

ተወካይ ምርቶች፡ QIAGEN RNeasy Plus እናForegeneአር ኤን ኤ የማጥራት ተከታታይ ምርቶች

(አርኔሲ ፕላስ)

(Foregene'sየእፅዋት ጠቅላላ አር ኤን ኤ ማግለል ስብስብ)

በጸጥታ ልንገርህ!የፎርጂን አር ኤን ኤ ኪት ለአጠቃቀም በጣም ቀላል የሆነ RNase Eraser ያቀርባል፣ ይህም በሰው አካል ላይ ምንም አይነት መርዛማ ንጥረ ነገር ሳይጨምር 400μg RNase በጠንካራው ወለል ላይ በ1 ደቂቃ ውስጥ ሙሉ በሙሉ ያስወግዳል።

ፎቶ1: የክወና ሂደት ንጽጽር ገበታ

የForegene ምርቶች የአር ኤን ኤ ማውጣትን በሁለት ዘፈኖች ብቻ ሊያጠናቅቁ ይችላሉ፣ ሌሎች በሙከራዎ ሂደት እንዲቀኑ አያድርጉ!

ፎቶ2፡Eየሙከራ ውጤቶች የንጽጽር ሰንጠረዥ

የመጀመሪያው ትውልድ (1: TRIzol)

ሁለተኛው ትውልድ (2፡ RNeasy of QIAGEN)

ሦስተኛው ትውልድ (3፡ QIAGEN's RNeasy plus፣ 4: Foregene)

ፎቶ3: qPCR ግራፍ (የማጉያ ​​ጥምዝ ግራፍ)

የመጀመሪያው ትውልድ (አረንጓዴ ማለት TRIzol - ቀይ ማለት TRIzol + ማለት ነው)

ሁለተኛው ትውልድ (ሰማይ ሰማያዊ ማለት QIAGEN RNeasy-፣ ቀይ ማለት QIAGEN RNeasy + ማለት ነው)

ሦስተኛው ትውልድ (ሰማያዊ ማለት QIAGEN RNeasy ፕላስ፣ አረንጓዴ ማለት Foregene ማለት ነው)

(ማስታወሻ፡ qPCR ግራፍ “-” ዲ ኤንኤስ እንዳልተጨመረ እና የዲኤንኤ መበከል እንዳልተወገደ ያሳያል። ስለዚህ ሲቲ ከፍ ያለ ነው ውጤቱም ትክክል አይደለም፤ “+” ዲናሴ መጨመሩን እና የዲኤንኤ መበከል መወገዱን ያሳያል፣ ውጤቱም ትክክለኛ ነው)

እያንዳንዱ ቴክኒካዊ ማሻሻያ ማለት የሙከራው አሠራር በቀላል እና ለተጠቃሚ ምቹ በሆነ አቅጣጫ እያደገ ነው ማለት ነው።

Foregene ተጨማሪ ሳይንሳዊ ተመራማሪዎች የሙከራ ጊዜን እና ወጪን እንዲቆጥቡ፣ ከፍተኛ ጥራት ያላቸውን የሙከራ ውጤቶችን እንዲያገኙ እና የበለጠ ጠቃሚ የሆኑ ሳይንሳዊ የምርምር ውጤቶችን እንዲፈጥሩ ለመርዳት ያለመ ነው።